棉花源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

棉花源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品基本信息

规格：50次/盒（20μL反应体系）

适用场景：科研用途（非临床诊断）

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

运输方式：泡沫箱加冰密封低温运输，阳性对照需单独存放。

产品特点

即开即用：用户仅需提供样品核酸模板，试剂盒预混优化引物、探针及反应体系。

高灵敏度与特异性：引物针对棉花源性成分高度保守区设计，避免与其他病毒RNA交叉反应。

双功能检测：支持定性与定量分析，定量线性范围达5个数量级（10^1–10^6拷贝/μL）。

内置对照：提供无传染性DNA片段作为阳性对照，便于区分假阴性结果。

兼容性：适配多数病毒RNA提取试剂盒，推荐配套使用柱式病毒RNAout或核酸释放剂。

操作流程

标准曲线制备

稀释阳性对照：

标记6管（6–1号），每管加45μL专用稀释液。

依次梯度稀释（10^7拷贝/μL起始），每次取5μL至下一管，震荡混匀，冰上暂存。

关键注意：操作需在独立洁净区进行，避免气溶胶污染。

样品RNA制备

设置N+2个提取（含阳性对照PC和阴性对照NC）。

使用推荐方法纯化RNA，或选用配套提取试剂。

荧光定量PCR反应

体系配置：20μL/反应，需避光操作。

标记管数：

定量分析：N+9管（样品、阴性对照、6个标准曲线点）。

定性分析：N+4管（样品、阴/阳性对照各1）。

加样顺序：优先完成样品管与阴性对照，最后处理阳性对照以防污染。

数据分析

定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样品浓度。

定性判定：

阴性：Ct≥40；阳性：Ct≤36；

临界值（36<Ct<40）需复测确认。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、加样需在不同区域进行，使用专用移液器及耗材。

质量控制：每次实验需包含阴/阳性对照，反应液避光保存，避免气泡干扰。

实验后处理：工作台及仪器需用10%次氯酸或75%酒精消毒。

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