柠檬酸杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

柠檬酸杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒采用探针法荧光定量PCR技术，专用于柠檬酸杆菌属（Citrobacter spp.）的快速、高特异性检测。适用于科研领域中对RNA制品的反转录及后续PCR扩增，可实现对目标基因的定性分析（非临床用途）。

产品特点

高灵敏度与特异性：引物及探针针对柠檬酸杆菌属高度保守区设计，避免与其他微生物发生交叉反应。

即开即用：预混优化试剂，仅需提供样品RNA模板。

内置对照：含阳性对照（无传染性DNA片段），便于区分假阴性结果。

操作便捷：PCR mix含上样染料，扩增产物可直接电泳。

稳定性：-20℃保存，避免反复冻融，有效期12个月。

技术参数

规格：50次/盒（20μL反应体系）

检测限：可检测低至10²拷贝/μL的模板。

荧光参数：激发波长471 nm，发射波长530 nm（结合DNA后）。

适用范围：食品、血液、粪便及病灶样本的RNA检测（需配合RNA提取试剂盒）。

操作流程

1. 样本前处理

RNA提取：建议使用柱式病毒RNA提取试剂盒，避免RNase污染。

阳性对照稀释：按10倍梯度稀释（10²~10⁷拷贝/μL），独立操作以防污染。

2. 反应体系配制

| 成分 | 体积（μL） |

| qRT-PCR缓冲液 | 10 |

| 酶混合液 | 2 |

| 探针 | 1 |

| 引物混合液 | 2 |

| 模板RNA | 5 |

3. PCR扩增程序

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 反转录 | 42℃ | 15 min | 1 |

| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 |

| 扩增 | 95℃ 15 s → 60℃ 1 min | 40 |

| 荧光采集 | 60℃ | 30 s | |

结果判读

定性分析：

阳性：Ct值≤35，且扩增曲线呈典型S型。

阴性：Ct值≥40或无扩增。

可疑（35<Ct<40）：需重复检测。

标准曲线：以阳性对照Ct值绘制log浓度曲线，推算样本初始模板量（若需半定量）。

注意事项

本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。

操作需在无菌环境下进行，穿戴实验服、口罩及手套。

避免试剂反复冻融，分装保存以维持稳定性。

探针法需避光保存，防止荧光淬灭。

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