组β溶血性链球菌（A组乙型溶血性链球菌）探针法荧光定量PCR试剂盒

组β溶血性链球菌（A组乙型溶血性链球菌）探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

预期用途

本试剂盒基于TaqMan探针法荧光定量PCR技术，用于检测A组β溶血性链球菌（GAS）的核酸，适用于咽喉拭子、血液、组织样本等临床或科研样本的辅助诊断。检测结果需结合临床表现和其他实验室指标综合判断，仅限科研使用，不可用于临床诊断或治疗。

检验原理

通过针对A组β溶血性链球菌基因保守区域设计的特异性引物和探针，在荧光定量PCR仪中扩增目标DNA片段，实时监测荧光信号实现定性和定量分析。

试剂组成

反应液（含dNTPs、酶等）：975μL×1管

扩增液（含引物、探针）：25μL×1管

阳性质控品（人工合成DNA片段）：50μL×1管

阴性质控品：50μL×1管

说明书：1份

注意：不同批号组分不可混用，避免反复冻融（≤7次）。

储存条件与有效期

储存温度：-20℃±5℃，避光保存。

有效期：12个月。

适用仪器

兼容ABI系列、MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等荧光定量PCR仪。

样本要求

样本类型：咽拭子、全血、组织、培养物等。

保存与运输：短期-20℃保存，长期-70℃以下；运输需2~8℃冰袋，避免反复冻融。

操作步骤

样本处理

使用商品化DNA提取试剂盒（推荐病毒基因组DNA提取试剂盒）提取样本核酸。

试剂配制

按N（样本数+阴阳性对照）计算反应体系，每反应需：

反应液19.5μL + 扩增液0.5μL。

分装至PCR管后，加入5μL模板DNA。

PCR扩增

设置扩增程序：预变性（95℃, 2min）→ 40循环（95℃ 15s, 60℃ 30s）。

荧光信号采集于60℃退火/延伸阶段。

结果判读

阳性：Ct值≤阈值，且扩增曲线呈S型。

阴性：无Ct值或Ct值＞阈值。

注意事项

实验需分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），避免污染。

阳性质控品需与样本同步提取，以监控提取效率。

失效或浑浊的试剂禁止使用。

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