大腹皮探针法PCR鉴定试剂盒

产品概述

本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术，专用于大腹皮（Pericarpium arecae）的特异性鉴定。通过优化引物和探针设计，确保高灵敏度和特异性，适用于科研领域的定性或定量检测。

产品特点

即开即用：预混PCR反应体系，仅需提供样品DNA模板。

高灵敏度：可检测低至10 ng的DNA模板。

高特异性：引物针对大腹皮高度保守区设计，避免交叉反应。

质控完善：含阳性质控品（Ct≤35）和阴性质控品（Ct≥40），确保结果可靠性。

快速检测：全程约3小时完成，支持20 μL或25 μL反应体系。

操作流程

样品处理

提取待测样品DNA，建议使用纯化后的DNA模板（浓度≥10 ng/μL）。

反应体系配置

按比例混合预混液、引物探针、模板DNA及阴/阳性质控品。

PCR扩增程序（以ABI 7500为例）

预变性：95℃ 3 min

扩增循环（40 cycles）：

95℃ 10 sec

60℃ 1 min（采集FAM通道荧光信号）

数据分析

基线设定：6-15 cycles（指数扩增前稳定区）。

阈值设定：高于阴性质控品扩增曲线最高点。

结果判读

阳性：Ct值＜38，且扩增曲线呈典型指数增长。

可疑：38≤Ct＜40，需复测确认。

阴性：Ct≥40或无扩增曲线。

注意：若阳性质控品Ct＞35或阴性质控品Ct＜40，实验视为无效。

注意事项

避免试剂反复冻融，分装后使用。

加样顺序建议：阴性质控品→待测样本→阳性质控品。

实验环境需严格分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区），防止污染。

自备物品

微量移液器、离心管、荧光定量PCR仪等。

用途：仅供科研使用，非临床诊断。

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