大枣探针法PCR鉴定试剂盒 新品

产品概述

本试剂盒采用探针法荧光定量PCR技术，专用于大枣（Fructus jujubae）的核酸定性及定量检测。通过优化引物与探针设计，确保高灵敏度和特异性，可区分目标序列与其他微生物的交叉反应。适用于科研用途，不适用于临床诊断。

产品规格

规格：50次/盒（20μL反应体系）

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

成分：

探针法qPCR缓冲液（500μL）

探针法qPCR酶混合液（50μL）

荧光PCR专用模板稀释液（1mL）

PCR引物-探针干粉（50T）

PCR阳性对照（10^7拷贝/μL，50μL）

操作流程

标准曲线制备

稀释阳性对照：

标记6管，依次加入45μL稀释液，梯度稀释阳性对照（10^7拷贝/μL）至10^1-10^6拷贝/μL。

每次稀释需更换枪头，震荡混匀后冰上静置。

样本DNA制备

提取要求：

建议设置N+2个样本（含阳性对照PC和阴性对照NC）。

兼容市售DNA提取试剂，推荐使用柱式纯化法或免提取核酸释放剂。

qPCR反应设置（20μL体系）

定量分析：需N+9反应管（含标准曲线、阴性对照）。

定性分析：仅需N+4反应管（含1个标准曲线点）。

反应体系：

| 成分 | 体积（μL） |

| qPCR缓冲液 | 10 |

| qPCR酶混合液 | 2 |

| 探针 | 1 |

| 引物混合液 | 2 |

| 模板DNA/标准品/水 | 5 |

扩增程序：

| 步骤 | 温度 | 时间 |

| 逆转录 | 50℃ | 30 min |

| 预变性 | 94℃ | 10 min |

| 40循环 | 94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM信号） |

数据分析

定量检测：

以标准曲线（log拷贝数 vs. Ct值）计算样本浓度。

定性检测：

阳性判定：Ct≤36，典型扩增曲线；

阴性判定：Ct≥40或无Ct值；

灰区结果（36<Ct<40）：需复测确认。

注意事项

防污染措施：

分区域操作（样本处理、试剂配制、扩增区）。

使用带滤芯枪头及专用工作服。

质量控制：

阳性对照Ct值应<30，阴性对照无扩增。

局限性：

结果受样本保存、提取效率及操作规范影响。

公司正在出售的产品