淡竹叶探针法PCR鉴定试剂盒

产品原理

本试剂盒基于实时荧光定量PCR（qPCR）技术，采用探针法检测淡竹叶特异性DNA序列。探针5'端标记荧光报告基团（如FAM），3'端标记淬灭基团（TAMRA），通过Taq酶的5'→3'外切酶活性切割探针，释放荧光信号，实现靶序列的定量与定性分析。

产品组成

| 成分 | 规格 | 保存条件 |

| qPCR缓冲液 | 500μL/管 | -20℃ |

| 酶预混液（含Taq酶） | 100μL/管 | -20℃ |

| 探针及引物混合液 | 150μL/管 | -20℃ |

| 阳性对照（DNA片段） | 50μL（1×10⁸拷贝/μL） | -20℃ |

| 模板稀释液 | 1mL | 室温 |

| 说明书 | 1份 | - |

操作步骤

1. 标准曲线制备（6个梯度稀释）

取阳性对照依次稀释（10⁷~10²拷贝/μL），冰上保存备用。

2. 样品DNA提取

使用柱式法或试剂盒提取样本DNA，建议设置阴/阳性对照。

3. PCR反应体系（20μL）

| 组分 | 体积（μL） |

| qPCR缓冲液 | 10 |

| 酶预混液 | 2 |

| 探针引物混合液 | 3 |

| 模板DNA | 5 |

4. 反应程序

| 步骤 | 温度 | 时间 |

| 预变性 | 95℃ | 10 min |

| 循环（40×）| 95℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集荧光） |

数据分析

定量检测：以标准曲线log值为横轴，Ct值为纵轴，计算样本浓度。

定性检测：阴性对照Ct≥40，阳性对照Ct≤30；样本Ct≤35判为阳性。

注意事项

保存与运输：-20℃避光保存，避免反复冻融；低温运输。

适用范围：仅限科研使用，不可用于临床诊断。

质量控制：建议每批次实验包含阴/阳性对照。

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