冬瓜皮探针法PCR鉴定试剂盒 新品

产品概述

本试剂盒采用探针法荧光定量PCR技术，专用于**冬瓜皮（Exocarpium benincasae）**的特异性鉴定。通过保守区设计的引物与探针，可实现高灵敏度、高特异性的DNA检测，适用于科研实验。

试剂盒组成

PCR预混液：含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl₂、反应缓冲液（2×浓度）。

引物与探针：针对冬瓜皮保守序列设计的特异性引物及荧光标记探针。

阳性对照：86 bp DNA片段（1×10^8 拷贝/μL），不含活体病原。

阴性对照：无模板对照（NTC）。

核酸释放剂（部分品牌提供）：用于DNA提取的试用装。

实验步骤

1. 样品DNA制备

使用兼容的DNA提取试剂盒纯化样本DNA，或采用试剂盒附赠的裂解液（如适用）。

2. 阳性对照稀释（6个梯度，10^2~10^7 拷贝/μL）

按1:10比例逐级稀释阳性对照，独立操作以避免污染。

3. qPCR反应体系（20 μL）

| 组分 | 体积（μL） |

| 2× PCR预混液 | 10 |

| 引物探针混合液 | 2 |

| DNA模板 | 5 |

| 超纯水 | 补至20 |

4. PCR扩增程序

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 预变性 | 95℃ | 1 min | 1 |

| 变性 | 95℃ | 15 sec | 30 |

| 退火/延伸 | 60℃ | 15 sec | |

5. 数据分析

以阳性对照Ct值绘制标准曲线，计算待测样本浓度。

结果判读：

阳性：Ct值＜38，有明显指数扩增。

可疑：38≤Ct＜40，需复测确认。

阴性：Ct≥40或无扩增。

注意事项

操作需在独立洁净区域进行，避免交叉污染。

仅限科研使用，不适用于临床诊断。

不同仪器（如ABI 7500、LightCycler480）需调整ROX参比染料使用（详见说明书）。

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