猫衣原体探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

猫衣原体探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒采用TaqMan探针法实时荧光定量PCR技术，特异性检测猫衣原体（Chlamydia felis，Cf或CP）的核酸。适用于眼睑分泌物、结膜分泌物、鼻腔分泌物等临床样本的病原学诊断，具有高灵敏度、高特异性及全流程质控特点。

检测原理

探针法设计：针对猫衣原体保守基因设计引物及探针，探针5'端标记荧光报告基团（如FAM），3'端标记淬灭基团。PCR扩增时，Taq酶的5'→3'外切酶活性切割探针，释放荧光信号，通过实时监测荧光强度实现定量分析。

内参基因：部分试剂盒以猫RPS7基因作为内标，避免假阴性。

产品特点

高灵敏度：最低检出限达1拷贝/Test，扩增效率≥96%（R²≥0.999）。

高特异性：与巴尔通体、弓形虫、猫疱疹病毒等常见病原体无交叉反应。

质控保障：含阳性对照（无传染性DNA片段）和阴性质控，支持室内质控。

便捷性：预分装冻干微球或即用型液体组分，常温运输（部分需-20℃保存）。

试剂盒组成

| 组分 | 规格（50T） | 功能 |

| qPCR缓冲液 | 500μL×1 | 提供反应体系 |

| 酶混合液 | 50-100μL | 含逆转录酶、Taq酶 |

| 引物探针混合液 | 100μL | 特异性扩增靶序列 |

| 阳性对照 | 50μL（1×10⁸拷贝/μL） | 标准曲线制备 |

| 模板稀释液 | 1mL | 样本稀释 |

操作步骤

1. 样本处理

核酸提取：推荐磁珠法或离心柱法提取RNA/DNA。

标准曲线制备：梯度稀释阳性对照（10²~10⁷拷贝/μL）。

2. PCR反应体系（20μL）

| 成分 | 体积 |

| 缓冲液 | 10μL |

| 酶混合液 | 2μL |

| 引物探针混合液 | 2μL |

| 模板RNA/DNA | 5μL |

3. 扩增程序

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 逆转录 | 50℃ | 30 min | 1 |

| 预变性 | 94℃ | 10 min | 1 |

| 扩增 | 94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM信号） | 40 |

结果判读

阳性：Ct值≤40，扩增曲线呈指数增长。

阴性：无Ct值或Ct值＞45。

可疑：40<Ct≤45，需复测确认。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在独立区域进行。

防污染：使用带滤芯枪头，实验后以10%次氯酸清洁台面。

储存：-20℃避光保存，避免反复冻融（≤5次）。

局限性

基因突变可能导致假阴性；交叉污染可能导致假阳性。

仅限科研使用（部分注明不可用于临床诊断）。

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