犬支原体探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

犬支原体探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于探针法荧光定量PCR（qPCR）技术开发，用于特异性检测犬支原体（Mycoplasma canis）的核酸，适用于科研用途。试剂盒包含优化的引物、探针及预混反应体系，可实现高灵敏度、高特异性的定量或定性分析。

产品特点

高特异性：引物及探针经生物信息学筛选，靶向犬支原体保守基因序列，特异性达100%，避免交叉反应。

灵敏度优异：最低检测限为10³ cfu/mL，无需增菌即可直接检测样本。

重现性可靠：经大量菌株验证，重现性为100%。

快速检测：全程耗时3-4小时，适用于临床样本、环境样本等。

双重质控：提供阳性对照，区分假阴性结果；阴性对照确保无污染。

线性范围广：定量检测时线性范围覆盖5个数量级。

产品组成

主试剂：预混qPCR反应液（含探针、引物、dNTPs、Taq酶等）

对照品：阳性对照（1×10⁸ copies/μL）、阴性对照（DEPC-H₂O）

辅助试剂：DNA提取建议兼容市售核酸提取试剂盒。

实验流程

样本制备：

提取样本DNA（组织、血液、细胞等），建议使用液氮或Trizol保存样本。

避免提供直接DNA/RNA样品，需沟通实验背景及基因信息。

标准曲线制备（选做）：

将阳性对照按10倍梯度稀释（10⁸~10³ copies/μL），用于定量分析。

qPCR反应体系配制：

每20 μL反应体系含：预混液10 μL、模板DNA 2 μL、DEPC-H₂O补足。

设置阴性对照（DEPC-H₂O）和阳性对照（10⁵ copies/μL）。

扩增程序：

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（40循环，荧光采集）。

结果判读

定性分析：

阳性：Ct值<35，S型扩增曲线；

阴性：Ct值>38或无Ct值；

可疑：Ct值35-38需复检。

定量分析：

以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样本拷贝数。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在不同区域进行，避免污染。

试剂保存：-20℃避光保存，有效期1年；避免反复冻融。

实验防护：使用一次性耗材，实验后以75%酒精或紫外灯处理工作台。

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