出血性大肠杆菌O157:H7(EHEC O157)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) 新品

 产品介绍：

出血性大肠杆菌O157:H7 (EHEC O157) 核酸检测试剂盒（荧光PCR法）是一种用于体外定性检测样本中肠出血性大肠杆菌O157:H7（Enterohemorrhagic Escherichia coli O157:H7, EHEC O157）核酸的诊断工具。该试剂盒基于实时荧光定量PCR（qPCR）技术，通过特异性扩增和检测病原体的毒力基因，来判断样本是否含有该致病菌。

检测原理

该试剂盒通常采用TaqMan探针法进行检测，其流程如下：

模板准备： 从待测样本（如食品、环境拭子或临床粪便样本）中提取细菌DNA。

荧光PCR扩增： 这是核心检测环节。反应体系中包含针对EHEC O157特异性毒力基因（如stx1、stx2、eae等）设计的引物和荧光标记的探针。

在PCR扩增过程中，如果样本中含有EHEC O157的DNA，TaqMan探针会与目标基因片段特异性结合，并在DNA聚合酶的作用下被水解，从而释放出荧光信号。

荧光定量PCR仪会实时监测反应管中的荧光信号。当荧光信号的增长曲线穿越设定的阈值线时，会记录下相应的循环数（Ct值）。

结果判读： 根据Ct值和扩增曲线的形态进行结果判定。通常，Ct值低于设定的阈值（如Ct≤38）且有典型的扩增曲线判为阳性，表明样本中检出EHEC O157核酸。

主要用途

该试剂盒主要用于以下几个方面：

食品安全检测： 用于食品（如牛肉制品、生鲜蔬菜等）中EHEC O157的污染检测，保障食品安全。

临床疾病诊断： 辅助诊断由EHEC O157引起的食源性疾病，如出血性肠炎，甚至更严重的溶血性尿毒综合征（HUS）。

公共卫生监测： 用于疾控中心（CDC）对食源性疾病暴发事件的溯源和流行病学调查。

环境监测： 检测生产环境、水源等是否存在该病原菌污染。

方法优势

相较于传统的细菌培养法或生化鉴定，荧光PCR法具有以下显著优点：

高特异性： 通过针对特异性毒力基因设计的引物和探针，能够精准识别EHEC O157，有效区分其他大肠杆菌或细菌，避免假阳性。

高灵敏度： 能够检测出样本中极低含量的病原菌DNA（部分产品最低检测限可达10³ CFU/mL或100 CFU/Test），有助于在细菌含量较低时做出准确判断。

快速高效： 整个检测过程（包括核酸提取和PCR扩增）通常可在数小时内完成，远快于传统培养法，适合对大量样本进行快速筛查。

操作安全： 采用闭管检测模式，扩增后无需开盖处理，大大降低了扩增产物污染导致假阳性结果的风险。

PCR试剂盒的核心类型：

1. 常规PCR试剂盒

原理：通过引物扩增目标DNA片段，产物经琼脂糖电泳检测。

特点：操作简单、成本低，适用于定性检测（如牛疱疹病毒1型PCR试剂盒）。

典型应用：动物病原体筛查。

2. 荧光定量PCR（qPCR）试剂盒

探针法（TaqMan）：

利用特异性探针结合目标序列，荧光信号实时监测扩增过程。

优势：高特异性（如牛白血病病毒试剂盒）、宽线性范围（10²–10⁷拷贝/μL）。

染料法（SYBR Green）：

染料嵌入双链DNA发光，成本较低，但需优化引物特异性。

3. 恒温扩增试剂盒

技术：LAMP、RPA等，无需热循环仪，适合现场检测。

公司正在出售的产品：

科研领域：

常规PCR试剂盒。

临床诊断：

探针法qPCR试剂盒（如牛白血病病毒，灵敏度100拷贝/反应）。

现场检测：

恒温扩增试剂盒（如LAMP法，90分钟出结果）