何首乌探针法PCR鉴定试剂盒 新品

何首乌探针法PCR鉴定试剂盒

商品属性

产品用途

种源性基因检测，仅限科研使用，不可用于临床诊断。

试剂盒组成

核心成分：

PCR MagicMix 3.0（预混酶与dNTPs）

引物及探针混合液（针对何首乌保守基因序列设计）

阳性对照（1×10^8 拷贝/μL）

超纯水（无核酸酶）

其他：说明书、冻存管。

保存与运输

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

运输：低温（-20℃）干冰运输，避免反复冻融。

操作步骤

标准曲线制备（定量检测适用）：

使用阳性对照进行10倍梯度稀释（10^1–10^6 拷贝/μL），独立分区操作以避免污染。

样本处理：

提取待测样本RNA/DNA（推荐柱式提取法或兼容的病毒RNA提取试剂盒）。

设置阴性对照（超纯水）和阳性对照（试剂盒提供）。

PCR反应体系（20μL/反应）：

按比例加入预混液、引物探针混合液、模板（2μL），离心混匀后上机。

扩增程序：

逆转录（50℃ 15分钟）→ 预变性（95℃ 5分钟）→ 40循环扩增（95℃ 15秒，60℃ 1分钟，荧光采集）。

结果判读

定量分析：以Ct值为纵轴、标准曲线log值为横轴计算样本浓度。

定性分析：

阳性：Ct≤36，扩增曲线呈S型。

阴性：Ct≥40或无扩增。

可疑（36<Ct<40）：需复测确认。

注意事项

防污染措施：

分区分工操作（样本处理、试剂配制、扩增检测）。

使用带滤芯枪头及专用工作服。

试剂处理：

使用前充分解冻混匀，短暂离心避免气泡。

阳性对照单独存放，避免交叉污染。

废弃物处理：实验后需用10%次氯酸或75%酒精消毒台面及器材。

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