降香探针法PCR鉴定试剂盒

降香探针法PCR鉴定试剂盒

商品属性

产品用途

专用于降香（Lignum dalbergiae odoriferae）的核酸定性及定量检测，仅限科研使用。

产品特点

即开即用：用户仅需提供样品DNA/RNA模板，预混试剂含优化引物、探针、酶及缓冲液。

高灵敏度与特异性：引物基于降香保守序列设计，避免与其他微生物核酸交叉反应。

双重质控：提供阳性对照（无传染性DNA片段）和阴性对照，有效区分假阴性。

兼容性广：支持探针法荧光定量PCR，适用于ABI、Roche等主流仪器。

灵活应用：可进行绝对定量（标准曲线法）或定性检测（Ct值阈值法）。

试剂盒组成

PCR MagicMix 3.0：含Taq酶、dNTPs、Mg²⁺及缓冲液（红盖，1 mL）

降香特异性引物探针混合液（白盖，100 μL）

阳性对照（1×10⁸拷贝/μL，黄盖，50 μL）

超纯水（亮黄盖，1 mL）

核酸释放剂（试用装）（绿盖，1 mL）

使用手册（含标准曲线制备指南）

操作流程

1. 标准曲线制备（定量检测）

梯度稀释阳性对照（10⁶-10¹拷贝/μL），每稀释度独立操作以避免污染。

以log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线，R²需≥0.99。

2. 样品处理

提取样品RNA/DNA（兼容柱式提取法或核酸释放剂）。

设置N+2个检测孔（含阴性对照和制备对照）。

3. PCR反应体系（20μL）

| 成分 | 体积（μL） |

| 2× PCR Mix | 10 |

| 引物探针混合液 | 2 |

| 模板DNA/RNA | 2 |

| 超纯水 | 补至20 |

4. 扩增程序

预变性：95℃ 3 min

循环：95℃ 15 sec → 60℃ 30 sec（40 cycles，荧光采集）

结果判读

定量分析：通过标准曲线计算样品拷贝数。

定性分析：

阳性：Ct≤36，扩增曲线呈S型。

阴性：Ct≥40或无Ct值。

可疑：36<Ct<40，需复测确认。

运输与保存

运输条件：低温干冰运输。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

注意事项

操作分区进行（试剂配制、样品处理、扩增区），避免气溶胶污染。

阳性对照需最后加入，防止污染其他反应管。

实验废弃物需经消毒处理后再丢弃。

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