焦槟榔探针法PCR鉴定试剂盒

焦槟榔探针法PCR鉴定试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于探针法荧光定量RT-PCR技术，专用于焦槟榔（Semen Arecae Preparata）的定性与定量检测。适用于科研用途，不可用于临床诊断。

规格与成分

试剂一：探针法qRT-PCR缓冲液（500μL）

试剂二：探针法qRT-PCR酶混合液（100μL）

试剂三：荧光PCR专用模板稀释液（1 mL）

试剂四：焦槟榔探针法qRT-PCR引物混合液（100μL）

试剂五：焦槟榔qRT-PCR探针（50μL）

试剂六：阳性对照（1×10⁸拷贝/μL，50μL）

说明书：1份

规格：50次/盒（20μL体系/次）

储存与运输

储存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

运输：低温泡沫箱加冰密封运输，避免反复冻融。

使用方法

1. 标准曲线制备（以10ⁱ⁻10⁶拷贝/μL为例）

标记6管（7至2号），依次稀释阳性对照（10倍梯度），每步换枪头，冰上保存。

2. 样品RNA制备

建议设置N+2个样本（含阳性/阴性对照）。

使用兼容的RNA提取试剂纯化样本，或选用配套提取试剂。

3. qRT-PCR反应（20μL体系）

体系配置：

样品管：10μL缓冲液 + 2μL酶混合液 + 1μL探针 + 2μL引物 + 5μL RNA模板。

阴性对照：以水替代模板。

标准曲线管：加入对应稀释度标准品5μL。

反应程序：

逆转录：50℃ 30 min

预变性：94℃ 10 min

40循环：94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM信号）

4. 数据分析

定量检测：以标准曲线log浓度-Ct值计算样本拷贝数。

定性检测：Ct≤36为阳性，≥40为阴性；36<Ct<40需复测。

注意事项

分区操作（样本处理、试剂配制、加样），避免交叉污染。

使用带芯枪头，反应液避光保存，彻底离心混匀。

阳性对照单独存放，严禁污染其他组分。

实验后以10%次氯酸或75%酒精消毒工作台。

性能参数

灵敏度：检测下限≤10拷贝/μL。

特异性：引物针对保守区设计，无交叉反应。

线性范围：10¹⁻10⁶拷贝/μL（R²≥0.99）。

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