伸筋草探针法PCR鉴定试剂盒

产品用途

专用于伸筋草DNA的定性及定量检测，适用于科研用途。

产品特点

高特异性：引物与探针经优化设计，仅扩增目标序列，无交叉反应。

灵敏度广：线性范围覆盖5个数量级（10^1–10^6拷贝/μL），支持定量分析。

便捷性：含预混缓冲液、酶混合液及阳性对照，即开即用。

多重质控：提供阳性对照（10^7拷贝/μL）及阴性对照，确保结果可靠性。

兼容性：与主流DNA提取试剂盒兼容。

包装规格

| 编号 | 成分 | 规格 |

| 试剂一 | 探针法qPCR缓冲液 | 500 μL |

| 试剂二 | 探针法qPCR酶混合液 | 50 μL |

| 试剂三 | 荧光PCR模板稀释液 | 1 mL |

| 试剂四 | PCR引物-探针干粉 | 50次反应 |

| 试剂五 | 阳性对照（10^7拷贝/μL） | 50 μL |

操作流程

1. 标准曲线制备（以10倍梯度稀释为例）：

使用阳性对照制备6个稀释度（10^6–10^1拷贝/μL），独立操作避免污染。

2. 样品DNA提取：

建议设置N+2个样本（含阴/阳性对照），采用兼容的DNA提取方法。

3. qPCR反应设置（20 μL体系）：

定量分析：需N+9个反应管（含标准曲线及对照）。

程序参数：

逆转录：50℃ 10 min → 预变性：95℃ 10 min → 40循环（95℃ 15 sec，60℃ 60 sec，采集FAM信号）。

4. 数据分析：

定量：以Ct值绘制标准曲线，计算样本浓度。

定性：Ct≤39为阳性，≥40为阴性；临界值（39–40）需复测。

保存与运输

保存：-20℃短期保存，-70℃长期保存（≤6个月）。

运输：2–8℃冰袋运输，避免反复冻融。

注意事项

分区操作（样本处理、试剂配制、扩增），防止交叉污染。

反应液避光保存，使用前充分离心混匀。

实验后需用10%次氯酸或75%乙醇消毒工作台。

阳性对照需单独存放，避免污染其他组分。

局限性

结果受样本质量、提取效率及操作规范影响。

基因变异可能导致假阴性；污染风险可致假阳性。

仅限科研使用，临床诊断需结合其他检测方法。

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