京大戟探针法PCR鉴定试剂盒

京大戟探针法PCR鉴定试剂盒

商品属性

产品概述

京大戟探针法PCR鉴定试剂盒是一种用于特异性检测京大戟（Radix euphorbiae pekinensis）的分子生物学工具，基于探针法荧光定量PCR技术，具有高灵敏度和特异性。适用于科研用途，可对组织、细胞、血液等样本中的目标核酸进行定性和定量分析。

产品特点

高特异性：引物和探针经优化设计，仅扩增京大戟目标序列，无交叉反应。

灵敏度优异：检测限低至10拷贝/μL，支持弱阳性样本的检出。

即开即用：预混反应体系（含上样染料），简化操作流程。

质量控制：提供阳性对照（无传染性DNA片段）和阴性对照，确保结果可靠性。

兼容性强：适配多数核酸提取试剂盒，支持DNA/RNA模板。

规格与成分

| 成分 | 规格/包装量 | 保存条件 |

| PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） | -20℃避光保存 |

| 超纯水 | 1 mL（亮黄色） | -20℃保存 |

| 引物探针混合液 | 100 μL（白盖） | -20℃避光保存 |

| 阳性对照（1×10^8拷贝/μL） | 50 μL（黄盖） | 单独存放，避免污染 |

| 使用说明书 | 1份 | 常温保存 |

实验流程

1. 样本制备

核酸提取：推荐使用柱式提取法或兼容的RNA/DNA提取试剂盒。

对照设置：需制备样品阳性对照（PC）和阴性对照（NC），PC为阳性对照的1000倍稀释液。

2. 反应体系（20μL/反应）

按比例混合PCR预混液、引物探针、模板核酸及超纯水。

标准曲线制备：6个梯度稀释阳性对照（10^1–10^6拷贝/μL）。

3. 扩增程序

预变性：95℃ 2分钟；

循环阶段：95℃ 15秒 → 退火（根据引物Tm值±2℃优化）30秒 → 72℃ 30秒，共40循环。

4. 数据分析

定量分析：以标准曲线计算样本浓度（Ct值≤36为阳性）。

定性分析：Ct值＜38判为阳性；38–40需复检。

注意事项

防污染措施：实验分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），使用滤芯吸头及DEPC水处理耗材。

GC-rich序列：建议添加5% DMSO优化扩增效率。

弱阳性样本：Ct值＞35时，需通过琼脂糖电泳验证产物特异性。

抑制剂处理：如遇血红素干扰，可将模板稀释10倍后复测。

运输与保存

运输条件：低温（-20℃）运输；

保存期限：12个月（避免反复冻融，阳性对照单独存放）。

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