橘核探针法PCR鉴定试剂盒 新品

橘核探针法PCR鉴定试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于聚合酶链式反应（PCR）技术，通过特异性引物和探针设计，实现对橘核（Semen citri reticulatae）DNA的高灵敏度、高特异性鉴定。适用于中药鉴定、科研分析等领域，仅限科研使用。

核心特点：

即开即用：预混PCR反应液（含Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg²⁺、缓冲液等），用户仅需提供DNA模板。

高特异性：引物经优化，仅扩增橘核靶序列，无交叉反应。

质控完善：提供阳性对照（1×10⁸拷贝/μL），便于排除假阴性。

便捷电泳：PCR Mix含上样染料，扩增产物可直接电泳检测。

试剂盒组成

| 成分 | 规格/包装 | 备注 |

| PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） | 含Taq酶、dNTPs、缓冲液 |

| 超纯水 | 1 mL（亮黄色） | 稀释或阴性对照 |

| 橘核引物混合液 | 100 μL（白盖） | 特异性引物及探针 |

| 阳性对照 | 50 μL（黄盖） | 1×10⁸拷贝/μL |

| 核酸释放剂（试用装）| 20次（1 mL，绿盖）| 可选DNA提取辅助 |

| 使用手册 | 1份 | 含详细操作流程 |

实验步骤

1. 样品DNA制备

使用自选方法或配套核酸释放剂提取样品DNA，建议设置阳性对照（10 μL阳性对照1000倍稀释液）和阴性对照（超纯水）。

提取后DNA置于冰上备用，避免降解。

2. PCR反应体系（40μL）

| 成分 | 样品管（N+2） | 阴性对照 | 阳性对照 |

| PCR MagicMix 3.0 | 20 μL | 20 μL | 20 μL |

| 引物混合液 | 2 μL | 2 μL | 2 μL |

| 样品DNA模板 | 18 μL | — | — |

| 阴性对照（水） | — | 18 μL | — |

| 阳性对照稀释液 | — | — | 18 μL |

3. PCR程序设置

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |

| 变性 | 95℃ | 15 sec | 35 |

| 退火 | 57℃ | 15 sec | |

| 延伸 | 72℃ | 40 sec | |

| 后延伸 | 72℃ | 10 min | 1 |

4. 结果检测

取10-20 μL扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳（2-2.5%）。

预期条带出现于阳性对照，阴性对照无扩增则为有效实验。

注意事项

防污染：阳性对照需单独存放，避免交叉污染。

重复实验：若样品无扩增，可稀释10倍后重新检测以排除抑制剂干扰。

酶选择：本试剂盒默认含Taq酶（扩增速度快，产物带A尾），需高保真可选用Pfu酶（需另购）。

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