苦杏仁探针法PCR鉴定试剂盒

苦杏仁探针法PCR鉴定试剂盒

商品属性

预期用途

本试剂盒基于TaqMan探针法实时荧光PCR技术，专用于苦杏仁核酸的体外定性检测，适用于科研用途（如植物基因鉴定、食品安全检测等），不可用于临床诊断或治疗。

检验原理

采用实时荧光定量PCR技术，针对苦杏仁基因保守区域设计特异性引物及探针。探针5'端标记FAM荧光基团，3'端含淬灭基团。PCR扩增时，Taq酶的5'→3'外切酶活性切割探针，释放荧光信号，通过仪器实时监测荧光强度实现靶序列的定性与定量分析。

试剂组成

| 组分名称 | 规格/数量 |

| PCR反应液 | 19.5μL/次 × 50次 |

| 扩增预混液 | 0.5μL/次 × 50次 |

| 阳性质控品（DNA片段） | 50μL × 1管（1×10^8拷贝/μL） |

| 阴性质控品 | 50μL × 1管 |

| 说明书 | 1份 |

注：不同批号试剂不可混用，避免反复冻融（≤7次）。

储存与运输

储存条件：-20℃±5℃避光保存，有效期12个月。

运输条件：冰袋（2~8℃）运输，严禁高温或反复冻融。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括：

ABI 系列（如7500、StepOnePlus）

Bio-Rad（CFX96）

Roche LightCycler

其他支持FAM通道的机型。

自备耗材：无核酸酶离心管、滤芯吸头（10/200/1000μL）、移液器等。

样本要求

样本类型：植物组织、加工食品提取物等。

处理建议：

使用商品化DNA提取试剂盒（推荐柱式法）。

提取后DNA建议-20℃短期保存，长期保存需-70℃。

避免污染：操作分区（样本处理、试剂配制、扩增区），使用独立耗材。

操作步骤

1. 试剂配制

解冻后涡旋混匀，离心10秒。

按N（样本数+阴阳性对照）计算反应体系：

每反应：19.5μL反应液 + 0.5μL扩增液。

2. 加样

各反应管加入5μL模板DNA（样本/阴阳对照）。

3. PCR扩增程序

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 | 荧光采集 |

| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 | 否 |

| 扩增 | 95℃ | 15 sec | 40 | 否 |

| | 55℃ | 30 sec | | 是 |

结果判读

阳性：Ct值≤35，且扩增曲线呈S型。

可疑：35<Ct<40，需重复检测。

阴性：Ct≥40或无扩增曲线。

定量分析：以标准曲线（10^2~10^7拷贝/μL梯度）计算样本浓度。

注意事项

仅限科研使用，不可用于临床。

避免试剂交叉污染，建议在超净台或PCR工作站操作。

阳性质控品为人工合成DNA片段，无生物传染风险。

公司正在出售的产品