雷丸探针法PCR鉴定试剂盒

雷丸探针法PCR鉴定试剂盒

商品属性

预期用途

用于雷丸核酸的体外定性或定量检测，适用于科研用途，不用于临床诊断。

检测原理

基于TaqMan探针法实时荧光定量PCR技术，通过靶向雷丸基因保守区域的特异性引物及荧光探针，实现核酸扩增与信号实时检测。

试剂盒组成

核心组分：

扩增试剂：

雷丸反应液（含PCR缓冲液、dNTPs、Mg²⁺等）

雷丸扩增液（含特异性引物及探针）

质控品：

阳性质控品（人工合成DNA片段，1×10⁸拷贝/μL）

阴性质控品（无核酸酶水）

辅助试剂：

荧光PCR专用模板稀释液

酶混合液（含Taq DNA聚合酶、逆转录酶等，适用于RNA检测版本）

注意：

不同批号组分不可混用。

试剂开封后需避免反复冻融（建议分装保存）。

储存与运输条件

储存温度：-20℃±5℃，避光保存。

有效期：12个月（未开封）。

运输条件：低温运输（冰袋或干冰）。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括：

ABI 7500/QuantStudio系列

Bio-Rad CFX系列

Roche LightCycler

其他支持FAM通道检测的设备。

样本要求

样本类型：

动物组织（肠道、血液等）

分泌物（粪便、呼吸道拭子等）

病毒培养物

样本处理：

核酸提取：推荐使用商品化DNA/RNA提取试剂盒。

保存条件：

短期：-20℃

长期：-70℃（避免反复冻融）。

实验操作流程

1. 试剂准备

解冻后涡旋混匀，离心分装至PCR管（20μL/管）。

反应体系示例：

| 组分 | 体积（μL） |

| 反应液 | 19.5 |

| 扩增液（含引物/探针） | 0.5 |

| 模板DNA/RNA | 5 |

2. PCR扩增程序

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 |

| 扩增 | 95℃ | 15 sec | 40 |

| | 55-60℃ | 30 sec | |

| 信号采集 | 60℃ | 1 min | |

3. 结果判读

阳性：Ct值≤35，且扩增曲线呈指数增长。

阴性：Ct值≥40或无扩增曲线。

灰区（35<Ct<40）：建议重复检测。

注意事项

污染控制：严格分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区）。

质控要求：每批次实验需包含阴/阳性对照。

适用范围：仅限科研使用，不可用于临床诊断。

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