莲子探针法PCR鉴定试剂盒 新品

莲子探针法PCR鉴定试剂盒

商品属性

预期用途

本试剂盒基于实时荧光探针PCR技术，用于莲（Nelumbo nucifera）种源或品种的特异性鉴定，适用于莲子及其加工产品的真伪鉴别、转基因成分检测（如适用）或物种溯源分析。

检测原理

特异性探针设计：针对莲子基因组中保守序列（如ITS、rbcL基因等）设计引物和荧光标记探针。

荧光信号扩增：PCR扩增过程中，探针与靶序列结合后释放荧光信号，通过实时监测荧光强度实现定量/定性分析。

主要组成成分

| 组分名称 | 规格/数量 | 保存条件 |

| PCR预混液（含酶、dNTPs） | 1管/测试数 | -20℃避光 |

| 阳性对照（莲子DNA） | 1管 | -20℃ |

| 阴性对照（无DNA水） | 1管 | 室温 |

| DNA提取试剂（可选） | 按规格配备 | 室温 |

储存及有效期

未开封：-20℃保存，有效期12个月。

开封后：2-8℃保存，建议7日内用完。

操作步骤

1. 样本处理

DNA提取：使用配套试剂或CTAB法提取样本DNA，建议浓度≥20 ng/μL。

2. PCR反应体系配制

| 组分 | 体积（μL/反应） |

| PCR预混液 | 15 |

| 引物探针混合液 | 2 |

| 模板DNA | 3 |

| 总体积 | 20 |

3. PCR扩增程序

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |

| 变性 | 95℃ | 15 sec | 40 |

| 退火/延伸 | 60℃ | 30 sec | |

结果判读

阳性：Ct值≤35，且扩增曲线呈S型。

阴性：无Ct值或Ct值＞40。

可疑：35＜Ct值≤40，建议重复检测。

注意事项

实验前穿戴防护用具，避免核酸污染。

试剂解冻后需涡旋混匀，短暂离心后使用。

不同仪器需优化扩增参数，具体参考仪器说明书。

局限性

不适用于高度降解或抑制剂超标的样本。

结果需结合其他方法（如测序）进一步验证。

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