Recombinant Human CD59 新品

产品概述：

Recombinant Human CD59（重组人CD59蛋白）是一种在大肠杆菌或真核系统中表达的重组蛋白，作为关键的补体调节因子，它通过抑制膜攻击复合物（MAC）的形成，保护宿主细胞免受补体介导的溶解，广泛用于炎症性疾病机制研究、异种移植排斥反应探索及补体相关药物筛选。

产品名称; Recombinant Human CD59

别名; 16.3A5, 1F5, 1F5 antigen, 20 kDa homologous restriction factor, CD 59, CD_antigen=CD59, CD59, CD59 antigen, CD59 antigen complement regulatory protein, CD59 antigen p18 20, CD59 antigen p18-20 (antigen identified by monoclonal antibodies 16.3A5, EJ16, EJ30, EL32 and G344), CD59 glycoprotein, CD59 molecule, CD59 molecule complement regulatory protein, CD59_HUMAN, Cd59a, Complement regulatory protein

宿主; E.Coli

表达区间; 26-102

分子量; 12kDa

标签; N-terminal His Tag

纯度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses

应用; Western Blot, ELISA

性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4

溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex

存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.

 存储条件：

冻干状态‌: 存储于-20°C以下，可稳定保存长达12个月。

‌复溶后‌: 在2-8°C下可保存1个月，需保持无菌环境。

‌注意事项‌: 避免反复冻融，以防止蛋白降解或活性损失。

使用说明：

复溶方法‌: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液（pH 7.4）溶解冻干粉，轻轻混匀至完全溶解。

‌应用建议‌:

‌实验用途‌: 适用于Western Blot、ELISA等检测，作为抗原或标准品。

‌浓度调整‌: 根据实验需求稀释，避免高浓度导致非特异性结合。

‌安全提示‌: 操作时需佩戴手套和护目镜，遵循实验室生物安全规范。

重组表达原理：

基因克隆‌：从牛基因组中获取CST3基因的编码序列（对应氨基酸31–148），插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。

‌宿主表达‌：将重组质粒转化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高，适合大规模生产。

‌蛋白纯化‌：利用His标签与镍柱亲和层析结合，实现高纯度（>95%）蛋白回收，再经透析或凝胶过滤去除杂质。

‌冻干保存‌：加入海藻糖作为保护剂，冻干后可长期稳定储存，复溶后保持天然构象和生物活性。

操作要点：

电泳条件‌：使用15% SDS-PAGE凝胶，以提高对小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。

‌转膜参数‌：采用湿转法，100 V、60–90分钟（4°C），使用PVDF膜（需甲醇预活化）。

‌抗体选择‌：

一抗：抗CST3多克隆抗体（如兔源抗体），推荐稀释比为1:1000。

二抗：HRP标记的山羊抗兔IgG，稀释比1:10,000。

‌显色方式‌：ECL化学发光法，预期条带位于‌~13.4 kDa‌处。

‌内参建议‌：由于CST3分子量较小，可选用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作为内参，避免条带重叠。

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