莲子心探针法PCR鉴定试剂盒 新品

莲子心探针法PCR鉴定试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于TaqMan探针法实时荧光定量PCR技术，专为莲子心（Plumula nelumbinis）的快速、高特异性鉴定设计。适用于中药材真伪鉴别、植物源性成分检测等科研领域，不可用于临床诊断。

产品特点

高特异性：针对莲子心保守基因区域设计引物及荧光探针，无交叉反应。

高灵敏度：最低检测限达100拷贝/μL，可检测微量DNA模板。

操作便捷：预混反应液含Taq酶、dNTPs及探针，仅需添加模板即可启动反应。

防污染设计：闭管检测降低气溶胶污染风险，内置阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）确保质控。

试剂盒组分

| 成分 | 规格（50次反应） |

| 2×预混MasterMix | 500 μL |

| 莲子心特异性引物混合液 | 100 μL |

| TaqMan探针 | 50 μL |

| 阳性对照DNA | 50 μL |

| 模板稀释液 | 1 mL |

实验流程

样本制备

样本类型：莲子心粉末、植物组织或提取液。

DNA提取：推荐使用柱式植物DNA提取试剂盒，A260/A280纯度应达1.8–2.0。

反应体系（25 μL）

| 组分 | 体积 |

| 预混MasterMix | 12.5 μL |

| 引物混合液 | 2 μL |

| 探针 | 1 μL |

| DNA模板 | 5 μL |

| 超纯水 | 补至25 μL |

扩增程序（ABI 7500为例）

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 预变性 | 95℃ | 10 min | 1 |

| 扩增 | 95℃ | 15 sec | 40 |

| 退火/延伸 | 60℃ | 1 min | |

| 荧光采集 | 60℃ | 10 sec | |

结果判读

阳性：Ct值≤35，扩增曲线呈S型。

阴性：Ct值≥40或无扩增曲线。

可疑：35<Ct<40需复测，复测后Ct<40判为阳性。

注意事项

分区操作：严格区分试剂准备区、样本处理区及扩增区，使用带滤芯枪头。

质控要求：阴性对照无扩增，阳性对照Ct值≤30，否则实验无效。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月，避免反复冻融。

局限性

仅限科研使用，不可替代临床检测。

无法区分活体与降解DNA。

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