麦芽探针法PCR鉴定试剂盒

麦芽探针法PCR鉴定试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于探针法荧光定量PCR（qPCR）技术，专为检测麦芽香肉杆菌（Carnobacterium maltaromaticum）或其他麦芽相关微生物（如Fructushordeigerminatus）设计。适用于食品、环境样本及饲料中目标菌的快速、高灵敏度定性/定量分析，仅限科研用途。

技术原理

探针法qPCR：

采用TaqMan探针技术，探针标记荧光报告基团（如FAM）和淬灭基团，特异性结合目标DNA序列。

PCR扩增时，Taq酶切割探针释放荧光信号，通过实时监测荧光强度实现定量分析。

高特异性：引物及探针针对目标菌保守基因区域（如16S rRNA或功能基因）设计，避免与其他微生物交叉反应。

试剂盒组成

| 成分 | 规格/功能 |

| 2×qPCR预混液 | 含dNTPs、缓冲液、Mg²⁺、Taq酶 |

| 特异性引物探针混合液 | 目标基因引物及荧光标记探针 |

| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 人工合成DNA片段，验证实验有效性 |

| 阴性对照（超纯水） | 排除污染及系统误差 |

| 荧光PCR模板稀释液 | 用于标准品或样本稀释 |

注意：不同批号试剂不可混用，阳性对照需单独操作以防污染。

性能参数

灵敏度：最低检测限100–500拷贝/反应。

线性范围：5个数量级（10²–10⁷拷贝/μL）。

检测时间：约2小时（50次反应）。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月；运输需低温（干冰/冰袋）。

操作流程

样本处理：

提取样本DNA（如食品匀浆液、环境样本），建议使用配套核酸提取试剂盒。

反应体系配制（示例：20μL体系）：

10μL预混液 + 2μL引物探针混合液 + 2μL模板DNA + 6μL无核酸酶水。

qPCR程序：

预变性：95℃ 5分钟 → 循环扩增（40×）：95℃ 15秒 → 60℃ 45秒（采集荧光信号）。

结果判读：

阳性：Ct值≤35，扩增曲线呈S型；

阴性：无扩增曲线或Ct值＞35。

注意事项

防污染：操作分区（样本处理、PCR配制、扩增区），使用带滤芯枪头。

质量控制：每批次实验需包含阳性/阴性对照。

适用范围：仅限科研，禁止临床诊断。

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