香附探针法PCR鉴定试剂盒

产品概述

本试剂盒采用探针法荧光定量PCR技术，专为香附（Rhizoma cyperi）的分子鉴定设计，适用于中药材真伪鉴别、质量控制及科研教学。试剂盒包含预混反应体系，操作简便，具有高特异性、高灵敏度及防污染设计，可检测低至100拷贝/μL的香附DNA。

核心参数

有效期：12个月（-20℃避光保存）

检测限：100拷贝/反应

适用样本：香附粉末、植物组织、药材提取物等。

试剂盒组成

| 成分 | 规格 | 功能说明 |

| 香附扩增液（含酶） | 25μL×1管 | 提供PCR核心酶系 |

| 香附反应液（含dNTPs）| 975μL×1管 | 缓冲体系与反应原料 |

| 阳性质控品 | 50μL×1管 | 实验有效性验证（1×10⁸拷贝/μL）|

| 阴性质控品 | 50μL×1管 | 污染监控（无菌水） |

| 使用手册 | 1份 | 操作流程与数据分析指南 |

操作流程

1. 样本制备

DNA提取：固体样本研磨后采用柱式法纯化，液体样本离心取沉淀裂解。

对照设置：每批次需包含阳性质控品（试剂盒提供）和阴性质控品（无菌水）。

2. PCR反应体系配置（20μL/反应）

| 成分 | 体积 |

| 香附反应液 | 19.5μL |

| 香附扩增液 | 0.5μL |

| DNA模板 | 5μL |

3. 扩增程序

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |

| 变性 | 95℃ | 15 sec | 40 |

| 退火/延伸 | 60℃ | 40 sec | |

信号采集：退火阶段通过FAM通道检测荧光信号。

4. 结果判读

阳性：Ct值 ≤35，扩增曲线呈S型；

阴性：无Ct值或Ct值 ≥40；

可疑：35 < Ct值 ≤40，需复测确认。

注意事项

防污染措施：

使用带滤芯吸头，分区操作（试剂配制、样本处理、PCR扩增区分离）。

扩增后产物需高压灭菌处理，避免开盖污染。

试剂保存：-20℃避光保存，避免反复冻融。

质控要求：

阴性质控品应无扩增信号；

阳性质控品Ct值 ≤30。

应用场景

中药材鉴定：鉴别香附真伪，排除莎草科近缘物种掺伪。

质量控制：评估药材加工过程中DNA完整性。

科研教学：植物分子鉴定及遗传多样性研究。

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