Recombinant Bovine CST3 新品

产品概述：

Recombinant Bovine CST3（Cystatin C）是一种重组牛源蛋白，属于半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族，主要功能为调节蛋白水解过程，在炎症反应和免疫调节中发挥关键作用。本产品通过基因工程技术在E.Coli宿主中表达，确保高纯度和生物活性，适用于多种科研场景。

产品名称：Recombinant Bovine CST3

别称：    ARMD11, bA218C14.4 (cystatin C), CST3, cystatin 3, cystatin C (amyloid angiopathy and cerebral hemorrhage), Cystatin C, cystatin-3, cystatin-C, Gamma-trace, MGC117328, Neuroendocrine basic polypeptide, Post-gamma-globulin     

宿主： E.Coli    
表达区间：31-148    

分子量：13.4 kDa    
标签：N-terminal His Tag    

纯度:Greater than 90% as determined by SDS-PAGE.

应用:Western Blot, ELISA

性状:Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution of 10 mM Hepes, 150 mM NaCl with 5% trehalose, pH 7.4.

溶解方法:Centrifuge the vial before opening, reconstitute in sterile distilled water to a concentration of 0.1-1 mg/ml by gently pipetting 2-3 times, don't vortex.

存储:The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.

存储条件：

冻干状态‌: 存储于-20°C以下，可稳定保存长达12个月。

‌复溶后‌: 在2-8°C下可保存1个月，需保持无菌环境。

‌注意事项‌: 避免反复冻融，以防止蛋白降解或活性损失。

使用说明：

复溶方法‌: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液（pH 7.4）溶解冻干粉，轻轻混匀至完全溶解。

‌应用建议‌:

‌实验用途‌: 适用于Western Blot、ELISA等检测，作为抗原或标准品。

‌浓度调整‌: 根据实验需求稀释，避免高浓度导致非特异性结合。

‌安全提示‌: 操作时需佩戴手套和护目镜，遵循实验室生物安全规范。

重组表达原理：

基因克隆‌：从牛基因组中获取CST3基因的编码序列（对应氨基酸31–148），插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。

‌宿主表达‌：将重组质粒转化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高，适合大规模生产。

‌蛋白纯化‌：利用His标签与镍柱亲和层析结合，实现高纯度（>95%）蛋白回收，再经透析或凝胶过滤去除杂质。

‌冻干保存‌：加入海藻糖作为保护剂，冻干后可长期稳定储存，复溶后保持天然构象和生物活性。

操作要点：

电泳条件‌：使用15% SDS-PAGE凝胶，以提高对小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。

‌转膜参数‌：采用湿转法，100 V、60–90分钟（4°C），使用PVDF膜（需甲醇预活化）。

‌抗体选择‌：

一抗：抗CST3多克隆抗体（如兔源抗体），推荐稀释比为1:1000。

二抗：HRP标记的山羊抗兔IgG，稀释比1:10,000。

‌显色方式‌：ECL化学发光法，预期条带位于‌~13.4 kDa‌处。

‌内参建议‌：由于CST3分子量较小，可选用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作为内参，避免条带重叠。

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