日本乙型脑炎病毒(JEV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) 新品

 产品介绍：

日本乙型脑炎病毒（Japanese Encephalitis Virus, JEV）核酸检测试剂盒（荧光PCR法）是一种专门用于检测日本乙型脑炎病毒核酸的分子诊断工具。该试剂盒基于实时荧光定量RT-PCR技术，能够快速、灵敏地检测样本中的JEV RNA，为乙型脑炎的早期诊断和监测提供直接的病原学证据。

1. 检测原理

该试剂盒采用一步法实时荧光RT-PCR（One-step Real-time RT-PCR）技术，通常基于TaqMan探针法。

靶标基因： 针对JEV基因组中的高度保守区域设计特异性引物和探针。常用的靶标基因包括NS1基因（非结构蛋白，用于通用检测）和E基因（囊膜蛋白，用于基因型鉴定和分型）。

反应机制： 反应体系中包含逆转录酶、DNA聚合酶、引物、探针和dNTPs。首先将病毒RNA逆转录为cDNA，随后进行PCR扩增。若样本中存在JEV核酸，FAM荧光标记的特异性探针会被水解，释放荧光信号。

内标质控（IC）： 为了监控样本提取和扩增过程，防止假阴性，试剂盒通常包含内标（如ROX标记），用于监控反应体系是否正常工作。

2. 产品特点

高特异性： 引物和探针经过优化，能特异性识别JEV，通常不会与西尼罗病毒、登革热病毒等其他黄病毒属病毒发生交叉反应。

高灵敏度： 最低检测限通常可达 1×10³ copies/mL（部分产品可达1000 copies/mL），能够检测到极低浓度的病毒，显著高于病毒分离法。

快速高效： 整个检测过程（包括核酸提取和PCR扩增）通常在 2-3小时 内完成，为临床诊断和疫情处置提供宝贵的时间窗口。

科研用途： 该试剂盒主要用于科研和临床辅助诊断，不能用于临床治疗，但能为乙脑的流行病学调查和病毒基因分型提供重要数据。

3. 主要用途

临床辅助诊断： 用于检测疑似感染者的脑脊液（首选样本）、血清、血液或脑组织样本，辅助确诊JEV感染。

疫情监测与溯源： 用于监测媒介蚊虫（如库蚊、伊蚊）中的病毒携带情况，评估传播风险。

动物检疫： 用于检测猪等中间宿主的病毒血症情况，切断传播链。

4.  储存与使用注意事项

储存条件： 试剂盒组分（特别是酶混合液）通常需要 -20℃ 避光保存，避免反复冻融（通常建议不超过3-5次），有效期通常为12个月。

样本类型： 主要用于检测脑脊液、血清/血浆、组织匀浆液（如脑组织）或蚊媒样本。

操作规范： 需在具备PCR检测资质的实验室进行，严格分区操作（试剂准备区、样本制备区、扩增区），防止气溶胶污染。

结果判读（参考值）：

阳性： FAM通道扩增曲线呈典型“S”型，且Ct值 ≤ 35-40（不同厂家设定阈值不同，通常为35或40）。

阴性： 无扩增曲线，或Ct值大于阈值。

无效： 阳性对照未扩增或内标（如有）未扩增，提示实验失败，需重做。

PCR试剂盒的核心类型：

1. 常规PCR试剂盒

原理：通过引物扩增目标DNA片段，产物经琼脂糖电泳检测。

特点：操作简单、成本低，适用于定性检测（如牛疱疹病毒1型PCR试剂盒）。

典型应用：动物病原体筛查。

2. 荧光定量PCR（qPCR）试剂盒

探针法（TaqMan）：

利用特异性探针结合目标序列，荧光信号实时监测扩增过程。

优势：高特异性（如牛白血病病毒试剂盒）、宽线性范围（10²–10⁷拷贝/μL）。

染料法（SYBR Green）：

染料嵌入双链DNA发光，成本较低，但需优化引物特异性。

3. 恒温扩增试剂盒

技术：LAMP、RPA等，无需热循环仪，适合现场检测。

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