伪狂犬病毒野毒株(PRV-gE)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) 新品

产品介绍：

伪狂犬病毒野毒株（PRV-gE）核酸检测试剂盒（荧光PCR法）是一种专门用于区分伪狂犬病毒（Pseudorabies Virus, PRV）野毒感染和疫苗毒感染的分子诊断工具。

伪狂犬病是猪场常见的病毒性疾病。目前，猪场普遍使用gE基因缺失疫苗（如Bartha-K61株）进行免疫。该试剂盒通过检测病毒基因组中是否存在gE基因，能够精准判断猪群是感染了野生型病毒（gE基因阳性），还是仅接种了疫苗（gE基因阴性），是猪场进行伪狂犬病净化、评估野毒感染压力的核心手段。

以下是关于该试剂盒的详细介绍：

1. 检测原理与技术

该试剂盒主要基于实时荧光定量PCR（qPCR）技术，通常采用TaqMan探针法。

核心机制：

靶标基因：针对伪狂犬病毒的gE基因（膜糖蛋白E基因）设计特异性引物和探针。

鉴别原理：目前的基因工程疫苗株通常缺失了gE基因（或gI/gE双缺失）。因此：

如果检测结果为阳性，说明样本中存在gE基因，即感染了野毒株（因为疫苗毒没有gE基因）。

如果检测结果为阴性，说明样本中没有gE基因，可能为疫苗免疫猪或未感染猪。

内标系统：试剂盒通常包含内参（Internal Control），用于监控样本提取和PCR扩增过程是否正常，防止假阴性。

优势：全封闭反应，特异性强，灵敏度高，可实现自动化检测，结果判读直观。

2. 试剂盒特点与性能

这类试剂盒专为猪场伪狂犬病净化设计，具有以下显著特点：

性能维度  描述

特异性  极高。专门针对gE基因，不会与猪瘟病毒（CSFV）、蓝耳病病毒（PRRSV）、圆环病毒（PCV2）等发生交叉反应。

灵敏度  极高。最低检测限通常可达 10³ copies/mL（部分产品可达100 copies/mL），能有效检出潜伏感染或低载量感染的猪群。

检测速度  快速。整个PCR扩增过程通常在 1.5 - 2 小时 内完成。

临床价值  鉴别诊断。是区分“疫苗毒”和“野毒”的金标准，指导猪场制定净化方案。

3. 适用样本与应用场景

适用样本：

组织样本：脑组织、扁桃体（野毒潜伏的主要部位）、肺脏、脾脏。

液体样本：血清、全血、鼻腔拭子（监测排毒）、精液（防止垂直传播）。

应用场景：

种猪场净化：定期监测种猪群（尤其是公猪和后备母猪）的gE抗体或核酸，淘汰野毒感染猪。

疫苗免疫效果评估：确认疫苗免疫后是否出现野毒干扰。

临床确诊：对出现神经症状、呕吐、死亡的仔猪进行确诊。

4.  操作注意事项

防污染：荧光PCR极其灵敏，必须严格分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），移液器需带滤芯吸头，防止气溶胶污染。

样本采集：

检测野毒感染时，扁桃体和脑组织的检出率通常高于血液。

鼻腔拭子可用于监测病毒的早期排毒。

结果解读：

阳性（+）：FAM通道出现典型的S型扩增曲线，且Ct值小于设定阈值（如Ct<35），提示感染了伪狂犬病毒野毒株。

阴性（-）：FAM通道无扩增曲线，或Ct值大于阈值，提示未检测到野毒感染（可能为疫苗免疫猪或健康猪）。

总结：伪狂犬病毒野毒株核酸检测试剂盒（荧光PCR法）是猪场实现伪狂犬病净化的“指南针”。它通过精准的分子检测技术，帮助猪场快速识别野毒感染源，为切断传播链、建立阴性种猪群提供了科学依据。

公司正在出售的产品：

1. 样本制备

使用核酸提取试剂盒纯化DNA/RNA，需设置阳性、阴性对照。

关键点：避免交叉污染，阳性对照单独存放。

2. 反应体系配置

常规PCR：引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。

qPCR：需额外加入探针或染料。

3. 扩增程序

常规PCR：

预变性→循环扩增→延伸

qPCR：

预变性→循环扩增（荧光采集）

4. 结果判读

常规PCR：电泳观察条带大小（如阳性对照需出现预期条带）。

qPCR：Ct值≤35为阳性，阴性对照无信号。