副猪嗜血杆菌(HPS)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) 新品

 产品介绍：

副猪嗜血杆菌（HPS）核酸检测试剂盒（荧光PCR法）是一种专门用于检测副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis, HPS）核酸的分子诊断工具。

副猪嗜血杆菌是引起猪格拉泽氏病（Glässer's disease）的病原体，常导致猪只发生多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎，是养猪业中常见的细菌性传染病，常在蓝耳病（PRRS）或圆环病毒（PCV2）感染后继发，造成巨大经济损失。传统的细菌培养法耗时长且容易受杂菌干扰，而荧光PCR法具有高灵敏度、高特异性和快速的特点，是目前实验室确诊和流行病学调查的首选方法。

以下是关于该试剂盒的详细介绍：

1. 检测原理与技术

该试剂盒主要基于实时荧光定量PCR（qPCR）技术，通常采用TaqMan探针法。

核心机制：

样本处理：从病猪的肺脏、脾脏、关节液、心包液或胸腹水等组织中提取细菌DNA。

荧光PCR扩增：针对副猪嗜血杆菌基因组中高度保守的区域（通常是16S rRNA基因、溶血素基因（vtaA）或NAD依赖性基因）设计特异性引物和探针。

信号检测：在PCR扩增过程中，随着细菌DNA的指数级扩增，荧光信号也随之增强，仪器实时监测荧光变化，从而判定样本中是否含有副猪嗜血杆菌。

优势：闭管检测，避免扩增产物污染；灵敏度极高（可检测几百拷贝/反应），能有效检出早期或低载量感染；特异性强，能区分HPS与其他巴氏杆菌科细菌。

2. 试剂盒特点与性能

这类试剂盒专为猪病防控设计，具有以下显著特点：

性能维度  描述

特异性  极高。引物和探针专门针对HPS设计，通常不会与猪链球菌、大肠杆菌、巴氏杆菌等发生交叉反应。

灵敏度  极高。最低检测限通常可达 10² - 10³ copies/mL，能有效检测出潜伏感染或病初样本。

检测速度  快速。整个PCR扩增过程通常在 1.5 - 2 小时 内完成。

临床价值  鉴别诊断。用于区分HPS引起的关节炎/胸膜炎与病毒性感染（如PRRSV）或其他细菌感染。

3. 适用样本与应用场景

适用样本：

组织样本：肺脏、脾脏、肝脏、脑组织（病死猪）。

液体样本：关节液、心包液、胸腹水、全血（活猪监测）。

其他：细菌培养物（用于菌种鉴定）。

应用场景：

临床辅助诊断：对出现发热、呼吸困难、关节肿胀、神经症状的猪群进行确诊。

继发感染监测：在蓝耳病爆发期间，监测是否继发HPS感染。

疫苗/药物研发：用于攻毒试验后的病原载量检测。

4. 操作注意事项

防污染：荧光PCR极其灵敏，必须严格分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），移液器需带滤芯吸头，防止气溶胶污染。

样本处理：

组织样本需充分研磨匀浆，离心取上清液进行核酸提取。

若样本需长期保存，应置于-70℃以下，避免反复冻融。

结果解读：

阳性：扩增曲线呈S型，且Ct值小于设定的阈值（如Ct<35），提示样本中含有副猪嗜血杆菌核酸。

阴性：无扩增曲线，或Ct值大于阈值。若内标未起峰，则结果无效，需重做。

总结：副猪嗜血杆菌核酸检测试剂盒（荧光PCR法）是现代养猪业进行疫病防控和净化的重要工具。它通过高灵敏度的分子检测技术，解决了传统细菌培养法耗时长、易污染的难题，为猪场的生物安全和临床治疗方案的制定提供了科学依据。

PCR试剂盒的核心类型：

1. 常规PCR试剂盒

原理：通过引物扩增目标DNA片段，产物经琼脂糖电泳检测。

特点：操作简单、成本低，适用于定性检测（如牛疱疹病毒1型PCR试剂盒）。

典型应用：动物病原体筛查。

2. 荧光定量PCR（qPCR）试剂盒

探针法（TaqMan）：

利用特异性探针结合目标序列，荧光信号实时监测扩增过程。

优势：高特异性（如牛白血病病毒试剂盒）、宽线性范围（10²–10⁷拷贝/μL）。

染料法（SYBR Green）：

染料嵌入双链DNA发光，成本较低，但需优化引物特异性。

3. 恒温扩增试剂盒

技术：LAMP、RPA等，无需热循环仪，适合现场检测。

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