伪狂犬病毒通用型(PRV-gB)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) 新品

产品介绍：

伪狂犬病毒通用型(PRV-gB)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) 是一种专门用于体外定性检测伪狂犬病毒（Pseudorabies Virus, PRV）核酸的分子诊断工具。

该试剂盒基于实时荧光定量PCR技术（qPCR），但与普通的gE基因缺失疫苗鉴别试剂盒不同，此试剂盒通常靶向gB基因（通用型）。gB基因是伪狂犬病毒的必需基因，在所有毒株（包括野毒和各种基因缺失疫苗株）中均高度保守。因此，该试剂盒主要用于检测样本中是否存在伪狂犬病毒的总感染（即不分野毒还是疫苗毒），广泛应用于临床诊断、病毒载量监测及科研。

以下是关于该试剂盒的详细介绍：

检测原理与技术

该试剂盒主要采用TaqMan荧光探针法，针对伪狂犬病毒的保守基因序列进行检测。

靶标基因：gB基因（糖蛋白B）。这是伪狂犬病毒的主要结构蛋白基因，具有高度的保守性，是“通用型”检测的金标准靶标。

技术原理： 由于伪狂犬病毒是DNA病毒，试剂盒采用荧光PCR法（不需要逆转录步骤）。

扩增与检测： 在PCR扩增过程中，特异性探针（通常标记为FAM荧光素）与gB基因结合。随着DNA的扩增，探针被酶切，释放出荧光信号。仪器实时监测信号变化，从而判断样本中是否存在伪狂犬病毒DNA。

内标系统： 试剂盒通常包含内源性内标（IC，标记为HEX/VIC或ROX），用于监控样本采集、核酸提取及PCR扩增过程是否正常，防止假阴性。

�� 核心性能指标

指标  参数  说明

检测样本  鼻拭子、脑组织、肺组织、扁桃体、全血  适用于多种临床病料

检测下限  1×10² - 1×10³ copies/mL  灵敏度高，可检出微量病毒

特异性  强  不与猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）等交叉反应

检测时间  约1.5小时  含核酸提取及PCR扩增步骤

保存条件  -20℃ ±5℃  避光保存，避免反复冻融

�� 典型操作流程

样本采集： 采集猪的鼻拭子、脑组织（伪狂犬病主要侵害神经系统）、肺组织或全血。

核酸提取： 使用试剂盒配套的DNA提取试剂（磁珠法或离心柱法）提取样本中的总DNA。

反应体系配制： 将提取的DNA模板、PCR反应液、酶混合物等按比例加入PCR反应管中。

上机扩增： 放入荧光定量PCR仪（如ABI 7500、Roche LightCycler等）中运行程序。

结果判读：

阳性： FAM通道出现典型的S型扩增曲线，且Ct值 ≤ 35-40，表明样本中存在伪狂犬病毒DNA。

阴性： FAM通道无扩增曲线，或Ct值 > 40。

�� 临床与应用意义

临床诊断： 用于快速确诊猪群是否感染伪狂犬病毒，特别是在仔猪出现神经症状（如转圈、倒地划水）或母猪出现繁殖障碍时。

病毒载量监测： 通过定量检测，评估猪群的带毒水平和排毒情况。

与gE试剂盒的区别：

PRV-gB（通用型）： 检测所有毒株（野毒 + 疫苗毒）。用于评估感染压力和病毒载量。

PRV-gE（鉴别型）： 仅检测野毒（gE基因缺失疫苗免疫猪检测不出）。用于评估野毒感染情况，是净化评估的核心工具。

⚠️ 注意事项

用途限制： 市场上大多数此类产品明确标注“仅用于科研”或“实验室专用”，不作为临床诊断的唯一依据，购买时需注意产品说明。

防污染： PCR实验室必须严格分区（试剂准备区、样本制备区、扩增区），操作人员需穿戴一次性手套和口罩，防止气溶胶污染导致的假阳性。

结果解读： 阳性结果表明存在伪狂犬病毒感染，但需结合猪群的临床症状、免疫背景（是否接种过疫苗）及病理变化进行综合判断。

公司正在出售的产品：

1. 样本制备

使用核酸提取试剂盒纯化DNA/RNA，需设置阳性、阴性对照。

关键点：避免交叉污染，阳性对照单独存放。

2. 反应体系配置

常规PCR：引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。

qPCR：需额外加入探针或染料。

3. 扩增程序

常规PCR：

预变性→循环扩增→延伸

qPCR：

预变性→循环扩增（荧光采集）

4. 结果判读

常规PCR：电泳观察条带大小（如阳性对照需出现预期条带）。

qPCR：Ct值≤35为阳性，阴性对照无信号。