禽流感病毒H5亚型(AIV-H5)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) 新品

产品介绍：

禽流感病毒H5亚型（AIV-H5）核酸检测试剂盒（荧光PCR法）是一种专门用于检测禽类样本中高致病性禽流感病毒H5亚型核酸的分子诊断工具。该试剂盒基于实时荧光定量PCR（qPCR）技术，是目前禽流感监测、临床诊断和疫情处置中最核心的检测手段之一。

1. 检测原理

该试剂盒采用一步法实时荧光RT-PCR（One-step Real-time RT-PCR）技术，通常基于TaqMan探针法。

靶标基因： 针对H5亚型禽流感病毒的血凝素（HA）基因保守序列设计特异性引物和探针。

反应机制： 反应体系中包含逆转录酶、DNA聚合酶、引物、探针和dNTPs。首先将病毒RNA逆转录为cDNA，随后进行PCR扩增。若样本中存在H5病毒核酸，FAM荧光标记的特异性探针会被水解，释放荧光信号。

内标质控（IC）： 为了监控样本提取和扩增过程，防止假阴性，试剂盒通常包含内标（如禽源β-actin基因），标记不同的荧光通道（如HEX/VIC）。

2. 产品特点

高特异性： 能特异性识别H5亚型，通常不会与H7、H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒（NDV）等其他禽类常见病原体发生交叉反应。

高灵敏度： 最低检测限通常可达 1×10² - 1×10³ copies/mL（部分产品可达100 copies/反应），能够检测到极低浓度的病毒，显著高于病毒分离法。

快速高效： 整个检测过程（包括核酸提取和PCR扩增）通常在 2-3小时 内完成，有助于疫情的早期发现和快速处置。

防污染机制： 试剂盒通常含有 UNG酶（尿嘧啶-N-糖基化酶）系统，可有效降解可能存在的扩增产物污染，防止假阳性结果。

3. 主要用途

临床辅助诊断： 用于检测疑似感染禽类的咽喉拭子、泄殖腔拭子、组织样本（如脾脏、肺脏、脑组织）或环境样本（如粪便、笼具擦拭物），辅助确诊H5感染。

疫情监测与净化： 用于活禽市场、养殖场的定期监测，评估生物安全措施效果，建立无疫区。

鉴别诊断： 用于与其他引起禽类呼吸道症状或高死亡率的疾病（如新城疫、H7/H9禽流感）进行鉴别诊断。

4. 储存与使用注意事项

储存条件： 试剂盒组分（特别是酶混合液）通常需要 -20℃ 避光保存，避免反复冻融（通常建议不超过3-5次），有效期通常为12个月。

样本类型： 主要用于检测拭子样本（咽喉、泄殖腔）、组织匀浆液或环境样本。

操作规范： 需在具备PCR检测资质的实验室进行，严格分区操作（试剂准备区、样本制备区、扩增区），防止气溶胶污染。

结果判读（参考值）：

阳性： FAM通道扩增曲线呈典型“S”型，且Ct值 ≤ 35-40（不同厂家设定阈值不同，通常为35或40）。

阴性： 无扩增曲线，或Ct值大于阈值。

无效： 阳性对照未扩增或内标（如有）未扩增，提示实验失败，需重做。

公司正在出售的产品：

1. 样本制备

使用核酸提取试剂盒纯化DNA/RNA，需设置阳性、阴性对照。

关键点：避免交叉污染，阳性对照单独存放。

2. 反应体系配置

常规PCR：引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。

qPCR：需额外加入探针或染料。

3. 扩增程序

常规PCR：

预变性→循环扩增→延伸

qPCR：

预变性→循环扩增（荧光采集）

4. 结果判读

常规PCR：电泳观察条带大小（如阳性对照需出现预期条带）。

qPCR：Ct值≤35为阳性，阴性对照无信号。