新城疫病毒中强毒(NDV-W)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) 新品

 产品介绍：

新城疫病毒中强毒（NDV-W）核酸检测试剂盒（荧光PCR法）是一种专门用于检测新城疫病毒（NDV）强毒株的分子诊断工具。该试剂盒基于实时荧光定量PCR（qPCR）技术，能够特异性识别并扩增新城疫病毒强毒株的核酸序列，从而实现快速、灵敏的检测。

1. 检测原理

该试剂盒采用实时荧光定量RT-PCR技术（qRT-PCR），通常基于TaqMan探针法。

靶标基因： 针对新城疫病毒强毒株的F基因（融合蛋白基因）裂解位点附近的保守序列设计特异性引物和探针。强毒株与弱毒株（疫苗株）在F蛋白裂解位点的氨基酸序列上存在显著差异（强毒株通常具有多个连续的碱性氨基酸），这是区分二者的关键分子标识。

反应机制： 试剂盒中的引物和探针能特异性识别强毒株的F基因序列。在PCR扩增过程中，若样本中存在NDV-W核酸，探针会被Taq酶水解并释放荧光信号（通常为FAM通道），仪器通过监测荧光信号的累积（Ct值）来判断样本中是否含有强毒株。

对照设置： 试剂盒通常包含阳性对照（已知浓度的强毒株核酸或质粒）和阴性对照（无核酸酶水），用于确保实验结果的准确性。

2. 产品特点

高特异性： 能够特异性检测新城疫病毒强毒株（NDV-W），与新城疫弱毒疫苗株（如LaSota株）、禽流感病毒（AIV）、传染性支气管炎病毒（IBV）等其他禽类常见病原体无交叉反应。

高灵敏度： 最低检测限通常可达 10² - 10³ copies/mL（部分产品可达100 copies/μL），能够检测到极低浓度的病毒核酸，有助于早期感染的发现。

快速高效： 整个检测过程通常在 2-4小时 内完成，远快于传统的病毒分离与鉴定方法（需数天时间），为疫情的快速处置争取宝贵时间。

操作简便： 采用一步法RT-PCR，操作简便，减少了配液误差和污染风险。

3. 主要用途

临床辅助诊断： 用于检测疑似感染禽类的组织样本（如脑、肺、脾、肾、肠等）、口咽拭子、泄殖腔拭子或组织匀浆液，辅助确诊新城疫强毒感染。

流行病学调查： 用于监测活禽市场、养殖场等环境中的新城疫病毒强毒株流行情况，评估疫情风险。

疫苗免疫效果评估： 用于区分野毒感染与疫苗免疫（鉴别诊断），评估疫苗免疫效果和群体健康状况。

4. 储存与使用注意事项

储存条件： 试剂盒组分（特别是酶混合液）通常需要 -20℃ 避光保存，避免反复冻融，有效期通常为12个月。

样本类型： 主要用于检测组织样本（脑、肺、脾、肾、肠等）、拭子样本（口咽、泄殖腔）或全血。

操作规范： 需在具备PCR检测资质的实验室进行，严格分区操作（试剂准备区、样本制备区、扩增区），防止气溶胶污染。

结果判读（参考值）：

阳性： FAM通道扩增曲线呈典型“S”型，且Ct值 ≤ 35（部分试剂盒设定为≤32或≤40，需参照说明书）。

阴性： 无扩增曲线，或Ct值 > 40。

可疑： Ct值在 35-40 之间，建议重复实验。若复测Ct值 < 40 且曲线呈S型，则判为阳性；否则判为阴性。

PCR试剂盒的核心类型：

1. 常规PCR试剂盒

原理：通过引物扩增目标DNA片段，产物经琼脂糖电泳检测。

特点：操作简单、成本低，适用于定性检测（如牛疱疹病毒1型PCR试剂盒）。

典型应用：动物病原体筛查。

2. 荧光定量PCR（qPCR）试剂盒

探针法（TaqMan）：

利用特异性探针结合目标序列，荧光信号实时监测扩增过程。

优势：高特异性（如牛白血病病毒试剂盒）、宽线性范围（10²–10⁷拷贝/μL）。

染料法（SYBR Green）：

染料嵌入双链DNA发光，成本较低，但需优化引物特异性。

3. 恒温扩增试剂盒

技术：LAMP、RPA等，无需热循环仪，适合现场检测。

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