禽传染性法氏囊病毒(IBDV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) 新品

产品介绍：

禽传染性法氏囊病毒(IBDV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) 是一种专门用于体外定性检测禽传染性法氏囊病毒（Infectious Bursal Disease Virus, IBDV）核酸的分子诊断工具。

该试剂盒基于实时荧光定量PCR技术（qPCR），主要用于鸡群中传染性法氏囊病的早期快速诊断、病原分型（经典株与变异株区分）及疫苗效果监测。鉴于IBDV是引起雏鸡免疫抑制的主要病原之一，精准检测对于养鸡业的疫病防控至关重要。

以下是关于该试剂盒的详细介绍：

检测原理与技术

该试剂盒主要采用TaqMan荧光探针法，通过设计特异性引物和探针，对病毒核酸进行扩增和检测。

双重/三重检测系统（分型检测）：

VP2基因（高变区）： 靶向VP2基因的高变区（HVR），通常标记为FAM荧光素。该区域是区分经典株（Classical）、变异株（Variant）和超强毒株（vvIBDV）的关键区域。

VP1基因： 靶向RNA依赖性RNA聚合酶基因，通常标记为HEX/VIC荧光素。该基因序列高度保守，用于通用检测，确保能检出所有I型IBDV。

内标（IC）： 部分高端试剂盒包含内源性内标（通常标记为CY5），用于监控样本采集、核酸提取及PCR扩增过程是否正常，防止假阴性。

技术原理： 由于IBDV是双链RNA病毒，检测需先将RNA逆转录为cDNA（一步法RT-qPCR）。在扩增过程中，随着目标序列的指数级扩增，探针被酶切释放荧光信号，仪器实时监测信号变化。

�� 核心性能指标

指标  参数  说明

检测样本  法氏囊组织（首选）、脾脏、泄殖腔拭子、环境样本（垫料/水）  法氏囊是主要靶器官，检出率最高

检测下限  1×10³ copies/mL  灵敏度高，可检出微量病毒

特异性  >95%  不与MDV（马立克）、CIAV（鸡贫血病毒）等交叉反应

检测时间  约2小时  含核酸提取及RT-PCR扩增步骤

保存条件  -20℃ ±5℃  避光保存，避免反复冻融

�� 典型操作流程

样本采集： 采集疑似感染鸡的法氏囊组织（最佳样本）、脾脏或泄殖腔拭子。

核酸提取： 使用试剂盒配套的病毒RNA提取试剂（磁珠法或离心柱法）提取样本中的总RNA。

反应体系配制： 将提取的RNA模板、PCR反应液、酶混合物等按比例加入PCR反应管中。

上机扩增： 放入荧光定量PCR仪（如ABI 7500、Roche LightCycler等）中运行程序。

结果判读：

阳性： FAM和/或HEX通道出现典型的S型扩增曲线，且Ct值≤35-40（具体阈值视说明书而定）。

阴性： 无扩增曲线，或Ct值>40。

分型判断： 根据FAM通道（VP2）和HEX通道（VP1）的扩增情况，结合标准曲线或软件分析，判断是经典株、变异株还是超强毒株。

�� 临床与应用意义

早期诊断： 在鸡群出现临床症状（如法氏囊出血、萎缩）初期即可确诊，比病毒分离更快，比抗体检测更早发现感染。

鉴别诊断： 用于区分IBDV与其他引起免疫抑制的病毒（如MDV、REOV）混合感染的情况。

流行病学调查： 监测不同地区、不同鸡场IBDV的流行毒株（特别是变异株的出现），为疫苗选择提供依据。

疫苗研发与质检： 用于疫苗外源病毒检测及疫苗免疫后病毒载量监测。

⚠️ 注意事项

用途限制： 市场上大多数此类产品明确标注“仅用于科研”或“实验室专用”，不作为临床诊断的唯一依据。

防污染： PCR实验室必须严格分区（试剂准备区、样本制备区、扩增区），操作人员需穿戴一次性手套和口罩，防止气溶胶污染导致的假阳性。

样本选择： 法氏囊组织是检测的“金标准”样本，发病初期（感染后3-5天）病毒载量最高，检出率最准确。

公司正在出售的产品：

1. 样本制备

使用核酸提取试剂盒纯化DNA/RNA，需设置阳性、阴性对照。

关键点：避免交叉污染，阳性对照单独存放。

2. 反应体系配置

常规PCR：引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。

qPCR：需额外加入探针或染料。

3. 扩增程序

常规PCR：

预变性→循环扩增→延伸

qPCR：

预变性→循环扩增（荧光采集）

4. 结果判读

常规PCR：电泳观察条带大小（如阳性对照需出现预期条带）。

qPCR：Ct值≤35为阳性，阴性对照无信号。