新城疫病毒(NDV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) 新品

 产品介绍：

新城疫（俗称“鸡瘟”）是由新城疫病毒引起的一种高度接触性传染病，对全球养禽业构成巨大威胁，尤其是高致病力毒株可导致鸡群极高死亡率。传统的血凝抑制（HI）试验主要用于抗体检测，而病毒分离鉴定耗时长。荧光PCR法凭借其高灵敏度、高特异性和快速的特点，已成为临床早期诊断、快速鉴别强弱毒株及流行病学监测的首选方法。

1. 检测原理与技术

该试剂盒主要基于实时荧光定量PCR（qPCR）技术，通常采用TaqMan探针法。

核心机制：

样本处理：从病死禽的脑、脾、肺、喉头、气管等组织，或活禽的咽喉/泄殖腔拭子中提取病毒RNA。

逆转录-PCR（RT-PCR）：由于NDV是单股负链RNA病毒，试剂盒通常包含逆转录酶（RT），先将病毒RNA逆转录为cDNA，再进行PCR扩增。

荧光检测：针对NDV基因组中高度保守的区域（通常是F基因（融合蛋白基因）或M基因（基质蛋白基因））设计特异性引物和TaqMan探针。

强弱毒鉴别：部分高级试剂盒设计针对F基因裂解位点的引物/探针，可直接通过荧光信号区分强毒株（基因型VI、VII等）与弱毒株（疫苗株如La Sota）。

2. 试剂盒特点与性能

这类试剂盒专为禽病快速防控设计，具有以下显著特点：

性能维度  描述

特异性  极高。引物和探针专门针对NDV设计，通常不会与禽流感病毒（AIV）、传染性支气管炎病毒（IBV）、传染性法氏囊病病毒（IBDV）等发生交叉反应。

灵敏度  极高。最低检测限通常可达 10² copies/mL，能有效检测出潜伏期或低载量感染的鸡群。

检测速度  快速。整个RT-PCR过程通常在 1.5 - 2 小时 内完成，配合快速核酸提取，可实现“即采即检”。

防污染  试剂盒通常含有UNG酶（dUTP/UNG系统），可有效防止扩增产物的残留污染。

3. 适用样本与应用场景

适用样本：

组织样本：脑组织、脾脏、肺脏、喉头、气管、法氏囊等（病死禽）。

拭子样本：咽喉拭子、泄殖腔拭子（活禽监测）。

尿囊液：鸡胚接种后的尿囊液（病毒分离物）。

应用场景：

临床辅助诊断：对出现神经症状、呼吸道症状或产蛋下降的鸡群进行确诊。

疫苗免疫监测：区分野毒感染与疫苗免疫（通过强弱毒鉴别试剂盒）。

无疫区/净化场监测：定期对种鸡场进行环境或血清学监测，确保生物安全。

4. 操作注意事项

防污染：荧光PCR极其灵敏，必须严格分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），移液器需带滤芯吸头，防止气溶胶污染。

样本处理：

组织样本需充分研磨匀浆，离心取上清液进行核酸提取。

若样本需长期保存，应置于-70℃以下，避免反复冻融。

结果解读：

阳性：扩增曲线呈S型，且Ct值小于设定的阈值（如Ct<35），提示样本中含有新城疫病毒核酸。

阴性：无扩增曲线，或Ct值大于阈值。若内标未起峰，则结果无效，需重做。

总结：新城疫病毒核酸检测试剂盒（荧光PCR法）是现代养禽业进行疫病防控和净化的重要工具。它通过分子诊断技术，极大地提高了检测的准确性和效率，为种鸡场的生物安全、疫情的快速响应及疫苗免疫策略的制定提供了科学依据。

PCR试剂盒的核心类型：

1. 常规PCR试剂盒

原理：通过引物扩增目标DNA片段，产物经琼脂糖电泳检测。

特点：操作简单、成本低，适用于定性检测（如牛疱疹病毒1型PCR试剂盒）。

典型应用：动物病原体筛查。

2. 荧光定量PCR（qPCR）试剂盒

探针法（TaqMan）：

利用特异性探针结合目标序列，荧光信号实时监测扩增过程。

优势：高特异性（如牛白血病病毒试剂盒）、宽线性范围（10²–10⁷拷贝/μL）。

染料法（SYBR Green）：

染料嵌入双链DNA发光，成本较低，但需优化引物特异性。

3. 恒温扩增试剂盒

技术：LAMP、RPA等，无需热循环仪，适合现场检测。

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