鸡马立克病毒(MDV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) 新品

 产品介绍：

鸡马立克氏病是一种由α疱疹病毒引起的高度接触性传染病，以淋巴组织增生和肿瘤形成为特征，在全球范围内对养禽业造成巨大经济损失。虽然该病可用疫苗预防，但野毒感染与疫苗毒的区分、早期诊断及净化监测至关重要。

�� 检测原理

该试剂盒基于实时荧光定量PCR（qPCR）技术，通常采用TaqMan探针法。

核心机制： 针对MDV基因组中的高度保守区域设计特异性引物和探针。

meq基因： 致瘤基因，是毒力标志物，常用于检测致病性野毒。

gB基因： 糖蛋白B基因，保守区检测靶点。

荧光检测： 反应体系中包含特异性荧光标记探针（通常为FAM通道）。若样本中含有MDV DNA，在PCR扩增过程中探针被水解，释放荧光信号，仪器通过Ct值（循环阈值）进行定性判断。

�� 主要特点与性能

特性  描述

高特异性  专门识别MDV，不与鸡传染性支气管炎病毒、新城疫病毒等其他禽类病原体发生交叉反应。

高灵敏度  最低检测限可达 1×10³ Copies/mL，能检出极低含量的病毒DNA。

定性/定量  主要用于定性筛查（判断阴阳性），部分试剂盒可通过标准曲线进行定量分析。

多重检测  部分高端试剂盒采用双重/三重荧光PCR，可同时检测meq（致瘤基因）和gB（保守基因），并包含内参系统（如鸡GAPDH基因，CY5通道）。

�� 临床与应用意义

早期诊断： 在鸡群出现临床症状（如肢体麻痹、消瘦）前，通过检测羽毛囊、血液或组织样本中的病毒DNA，实现早期预警。

种鸡场净化： 用于种鸡群的定期监测，淘汰阳性鸡只，建立SPF（无特定病原）种群。

疫苗效果评估： 监测免疫鸡群的带毒排毒情况，评估疫苗保护率。

流行病学调查： 用于追踪传染源，分析病毒在不同鸡场间的传播路径。

适用样本类型

羽毛囊： 首选样本，无创采集，病毒含量丰富，适用于活禽筛查。

组织样本： 脾脏、肝脏、法氏囊等内脏器官，用于病死鸡的确诊。

拭子样本： 咽喉拭子、泄殖腔拭子，用于监测排毒情况。

血液/血清： 用于检测病毒血症。

⚠️ 注意事项

防污染： PCR检测灵敏度极高，必须严格分区操作（试剂准备、样本处理、扩增检测），防止扩增产物气溶胶污染导致假阳性。

样本处理：

组织样本需充分研磨匀浆。

羽毛囊样本需确保带有皮屑和根部组织。

结果判读：

阳性： Ct值 ≤ 35-38（视说明书而定，通常为35或38）且扩增曲线呈典型S型。

可疑： Ct值在 35-38 之间，建议重复检测或结合临床症状判断。

阴性： Ct值 > 38 或无扩增曲线。

内标监控： 若使用含内标的试剂盒，需确认内标（如VIC/HEX通道）是否正常扩增，以排除样本中存在PCR抑制物导致的假阴性。

PCR试剂盒的核心类型：

1. 常规PCR试剂盒

原理：通过引物扩增目标DNA片段，产物经琼脂糖电泳检测。

特点：操作简单、成本低，适用于定性检测（如牛疱疹病毒1型PCR试剂盒）。

典型应用：动物病原体筛查。

2. 荧光定量PCR（qPCR）试剂盒

探针法（TaqMan）：

利用特异性探针结合目标序列，荧光信号实时监测扩增过程。

优势：高特异性（如牛白血病病毒试剂盒）、宽线性范围（10²–10⁷拷贝/μL）。

染料法（SYBR Green）：

染料嵌入双链DNA发光，成本较低，但需优化引物特异性。

3. 恒温扩增试剂盒

技术：LAMP、RPA等，无需热循环仪，适合现场检测。

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