阴沟肠杆菌核酸检测试剂盒 新品

 产品介绍：

阴沟肠杆菌（Enterobacter cloacae）核酸检测试剂盒是一种用于体外定性检测阴沟肠杆菌核酸的分子生物学产品。该试剂盒主要用于科研领域，辅助进行细菌鉴定、感染源追踪及环境监测。

1. 检测原理

试剂盒主要基于聚合酶链式反应（PCR）技术，包括普通PCR和实时荧光定量PCR（qPCR）。

靶标基因： 针对阴沟肠杆菌基因组中的特异性保守序列设计引物和探针。常见的靶标区域包括16S rRNA基因或其他种属特异性的持家基因。

技术方法：

TaqMan探针法（荧光定量）： 在反应体系中，特异性探针与靶序列结合并被水解，释放荧光信号（通常为FAM通道），通过实时监测荧光增量来判断结果。

普通PCR法： 通过特异性引物扩增目标片段（如494 bp或551 bp），扩增产物需通过琼脂糖凝胶电泳进行检测，依据条带大小判断结果。

内标/对照： 试剂盒通常包含阳性对照（特异性DNA片段）和阴性对照（无DNA/RNA酶水），用于确保实验结果的准确性，防止假阴性或假阳性。

2. 产品特点

高特异性： 引物和探针经过生物信息学分析和实验验证，确保只扩增阴沟肠杆菌，不与近缘肠杆菌属（如产气肠杆菌）或其他呼吸道/肠道致病菌发生交叉反应。

高灵敏度： 灵敏度通常可达 10³ cfu/mL（部分产品可达10² cfu/mL），能够检测到极低浓度的细菌，无需繁琐的增菌过程。

快速高效： 整个检测过程（包括核酸提取和PCR扩增）通常在 2-4 小时 内完成，远快于传统培养法。

即用型设计： 部分试剂盒（如2×qPCR MagicMix）预混了酶、dNTPs和缓冲液，用户只需加入模板和引物即可上机，操作简便。

3. 主要用途

科研鉴定： 用于微生物学研究中，对分离菌株进行快速种属鉴定。

感染诊断辅助： 辅助检测临床样本（如痰液、血液、尿液）中的阴沟肠杆菌，特别是在细菌培养困难或耗时较长的情况下。

环境与食品检测： 用于检测食品、水源或环境样本中的阴沟肠杆菌污染情况。

耐药基因研究： 部分高级试剂盒可用于检测与碳青霉烯类抗生素耐药相关的基因（如AmpC酶基因）。

4. 储存与使用注意事项

储存条件： 试剂盒组分（特别是酶和引物）通常需要 -20℃ 避光保存，避免反复冻融（通常不超过10次），有效期一般为12个月。

样本类型： 主要用于检测细菌培养物、痰液、咽拭子、粪便或组织样本。

操作规范： 需在具备PCR检测资质的实验室进行，严格分区操作（试剂准备区、样本制备区、扩增区），防止气溶胶污染。

结果判读：

荧光PCR： Ct值 ≤ 35 为阳性；Ct值 ≥ 40 为阴性；35-40之间建议重复实验。

普通PCR： 电泳图谱中出现预期大小（如494 bp）的特异性条带为阳性，无条带为阴性。

PCR试剂盒的核心类型：

1. 常规PCR试剂盒

原理：通过引物扩增目标DNA片段，产物经琼脂糖电泳检测。

特点：操作简单、成本低，适用于定性检测（如牛疱疹病毒1型PCR试剂盒）。

典型应用：动物病原体筛查。

2. 荧光定量PCR（qPCR）试剂盒

探针法（TaqMan）：

利用特异性探针结合目标序列，荧光信号实时监测扩增过程。

优势：高特异性（如牛白血病病毒试剂盒）、宽线性范围（10²–10⁷拷贝/μL）。

染料法（SYBR Green）：

染料嵌入双链DNA发光，成本较低，但需优化引物特异性。

3. 恒温扩增试剂盒

技术：LAMP、RPA等，无需热循环仪，适合现场检测。

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