Pandemic2009H1N1流感病毒HA基因核酸检测试剂盒 新品

检验原理：

本试剂盒采用实时荧光RT-PCR技术，针对甲型H1N1（2009）流感病毒HA基因高度保守区域设计特异性引物和

探针。在反应体系中，病毒RNA经逆转录为cDNA后，通过Taq酶介导的链式反应扩增目标序列，荧光信号随扩

增产物积累而增强。当荧光值超过阈值时，判定为阳性结果，实现病毒核酸的定性检测。

主要组成成分：

‌核心组分‌

HA基因特异性引物（上游引物：5'-CAACACCAACTTTGCTGC-3'；下游引物：5'-GGAACCGATTCTTA(C/T)ACTGTTGTC-3'）

TaqMan探针（5'-CAGT CAGTGGTTTCCGTGAAATTA GC-3'，标记FAM荧光基团）

逆转录酶、Hot-Start Taq酶、dNTPs、Mg²⁺缓冲液

‌辅助材料‌：

阳性对照（灭活病毒RNA，用于验证检测有效性）

阴性对照（无模板试剂，用于排除污染）

裂解液（用于样本核酸释放）

核酸提取试剂（可选配套使用，需符合ISO 13485标准）

检验方法：

1. 样本处理

‌核酸提取‌：采用磁珠法或离心柱法提取RNA，洗脱体积建议50-100μL。提取后RNA需立即用于检测或保存于-80℃。

‌操作步骤‌：

在生物安全柜中，将样本裂解液与拭子混合，室温静置10分钟。

加入磁珠或离心柱，按试剂说明书完成结合、洗涤和洗脱步骤。

洗脱液转移至无核酸酶离心管，备用。

2. 荧光PCR反应

‌反应体系‌（20μL体系）：

2×RT-PCR Mix 10μL

引物探针混合液 1μL

模板RNA 5μL

无核酸酶水 4μL

‌反应程序‌：

逆转录：50℃ 15分钟

预变性：95℃ 10分钟

扩增循环（40次）：95℃ 15秒，60℃ 45秒（荧光信号采集）

‌质量控制‌：

阳性对照：Ct值≤35且曲线呈"S"形，提示体系有效。

阴性对照：无Ct值或Ct值>40，提示无污染。

注意事项：

1‌、严防污染‌

‌分区操作‌：必须在独立的生物安全柜内进行样本处理、试剂配制和加样，避免气溶胶交叉污染。

‌专用耗材‌：使用无核酸酶的枪头、EP管等，建议使用带滤芯枪头。

‌规范操作‌：加样后立即盖紧管盖，避免试剂外溅。

‌2、保证质量‌

‌样本处理‌：样本采集后应立即冷藏（2-8℃），长期保存需置于-70℃以下，避免反复冻融^[历史回答]^。

‌试剂保存‌：严格按照说明书要求的温度（通常是-20℃或2-8℃）保存试剂，避免反复冻融。

‌对照设置‌：每次实验必须设置阳性对照、阴性对照和空白对照，监控实验有效性^[历史回答]^。

3‌、注意安全‌

‌生物安全‌：阳性样本需按生物安全三级标准处理，实验人员需佩戴个人防护装备（PPE）。

‌废弃物处理‌：所有废弃物（包括耗材、样本）需经121℃高压灭菌30分钟后方可丢弃^[历史回答]^。

公司正在出售的产品：