小鼠胰羧肽酶B1(CPB1)ELISA试剂盒 新品

小鼠胰羧肽酶B1(CPB1)ELISA试剂盒

产品简介:

检测原理

采用双抗夹心法，将CPB1抗体包被在微孔板上，加入标准品或样本后，样本中的CPB1与固相抗体结合。随后加入生物素化的CPB1抗体，再加入HRP标记的亲和素。最后加入TMB底物显色，颜色深浅与CPB1含量正相关。

性能指标

检测范围：6.25-400pg/mL。

灵敏度：最小可检测剂量小于等于2.52pg/mL。

特异性：与其它相似物质无明显交叉反应。

精密度

批内差：CV<10%。

批间差：CV<12%。

回收率：血清、EDTA血浆和肝素血浆的平均回收率分别为92%、91%和99%。

线性：在一定稀释范围内，测定值与理论值比率良好。

实验步骤

准备：平衡试剂盒至室温，配制试剂。

加样：标准品和样本加100μL，37℃孵育1小时。

洗涤：吸弃液体，加检测溶液A，37℃孵育1小时，洗涤3次。

显色：加检测溶液B，37℃孵育30分钟，洗涤5次，加TMB底物显色，加终止液后读数。

样本要求

血清：室温放置或4℃过夜，离心取上清。

血浆：使用EDTA或肝素抗凝，离心取上清。

其他样本：组织匀浆、细胞培养上清等需适当处理。

保存与稳定性

保存条件：未开封试剂盒按标签保存，标准品等需-20℃保存。

稳定性：有效期内活性降低率小于5%。

注意事项

实验环境保持一致，由同一实验员操作以减少误差。

样本避免反复冻融，按需分装保存。

注意事项

严格按照说明书操作，避免交叉污染和非特异性结合。

样本避免反复冻融，未用完的板条密封冷藏（2-8℃）保存。

试剂盒组分不可混用，标准品建议一次性使用。

血浆、血清及组织样本需规范处理，避免溶血和杂质干扰。

该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点，是兔MIP-3α/CCL20定量检测及相关疾病机制研究的可靠工具，广泛应用于兔免疫、炎症、感染等领域的科研。

常见问题解答 (FAQ)

Q1: 为什么要做“复孔”？

A: 建议每个样本（包括标准品）都做复孔（2-3个孔）。这样可以计算平均值，减少操作误差，提高数据的可信度。

Q2: 样本需要稀释吗？

A: 是的。如果样本浓度过高，超出了标准曲线的检测范围，需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时，记得乘以稀释倍数。

Q3: 结果出现“花板”（背景不均）怎么办？

A: 可能原因包括：洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂（如底物）受光照分解。请检查洗板机是否堵塞，确保温育箱温度恒定。

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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。