小鼠抗卵清蛋白IgE抗体(OVAIgE)ELISA试剂盒 新品

产品介绍：

产品特点

高灵敏度：最低检测限可达0.1-0.938 ng/mL，能够检测低浓度的抗卵清蛋白IgE抗体。

高特异性：试剂盒中的抗体经过优化，可特异性识别抗卵清蛋白IgE抗体，减少交叉反应。

操作简便：试剂盒包含预包被微孔板、标准品、酶标抗体等必要组分，简化了实验步骤。

适用样本

血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆及相关液体样本。

检测原理

双抗体夹心法：微孔板包被抗小鼠IgE抗体，样本中的抗卵清蛋白IgE抗体与之结合，再与生物素标记的卵清蛋白结合，最后通过HRP标记的链霉亲和素显色，颜色深浅与抗体浓度成正比。

间接法：微孔板包被卵清蛋白，样本中的抗卵清蛋白IgE抗体与之结合，再与HRP标记的二抗结合，显色后通过酶标仪测定吸光度。

试剂盒组成

预包被微孔板：96孔或48孔板，已包被捕获抗体。

标准品：已知浓度的抗卵清蛋白IgE抗体标准品。

酶标抗体：HRP标记的检测抗体。

洗涤液、底物液、终止液：用于洗涤和显色反应。

检测步骤

标准品稀释：按说明书稀释标准品，制备不同浓度的标准溶液。

加样：在微孔板中加入标准品和样本，设置空白对照孔。

温育：封板后于37℃温育，使抗体与抗原充分结合。

洗涤：弃去液体，用洗涤液多次洗涤，去除未结合物质。

加酶：加入酶标抗体，再次温育和洗涤。

显色：加入底物液，显色后加入终止液终止反应。

测定：使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度，通过标准曲线计算样本浓度。

注意事项

样本处理：避免使用含的样本，防止抑制HRP活性。

保存条件：试剂盒需在2-8℃保存，有效期6个月。

操作规范：严格按照说明书操作，确保实验结果的准确性。

主要优点缺点

维度  优势 (Pros) 劣势 (Cons)

检测性能   灵敏度极高，特异性强，结果准确  可能存在交叉反应，易受干扰物影响

操作体验   流程标准化，无需昂贵设备，适合高通量检测   步骤多且繁琐，耗时较长，对操作技巧有要求

经济成本   适合大批量样本检测，长期看性价比尚可   单次试剂成本较高，且不同批次可能存在差异

应用范围   可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本   对样本质量（如是否溶血）敏感

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试剂与样本准备阶段

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。