小鼠MCP-1/CCL2elisa试剂盒 新品

小鼠MCP-1/CCL2elisa试剂盒

产品简介:

小鼠MCP-1/CCL2 ELISA试剂盒是一种用于定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等样本中单核细胞趋化蛋白1（MCP-1/CCL2）浓度的科研工具。该试剂盒采用双抗体夹心ELISA法，具有高灵敏度和良好的特异性，能够准确测定MCP-1/CCL2含量，广泛应用于炎症、免疫调节、肿瘤微环境等研究领域。

主要特点

检测原理：预包被抗小鼠MCP-1/CCL2特异性抗体，样本中的MCP-1/CCL2与抗体结合后，加入酶标二抗，形成免疫复合物。加入TMB显色底物后，颜色深浅与MCP-1/CCL2浓度成正比，通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度，样本浓度与OD值呈正相关。

灵敏度：最低检测限可达1.0 pg/mL ～ 16.2 pg/mL，检测范围常见为3.91 pg/mL ～ 250 pg/mL或更高（不同品牌有所差异）。

样本类型：血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）、细胞上清、组织匀浆等，需避免反复冻融和污染。

试剂盒规格与保存：常见规格为48T或96T，2-8℃保存，标准品建议-20℃保存。

特异性：仅识别小鼠MCP-1/CCL2，与其他趋化因子或细胞因子无明显交叉反应。

精密度：板内、板间变异系数均小于10%，数据稳定可靠。

典型操作流程

标准品与样本加样：设标准孔、样本孔，按说明书梯度稀释标准品和待测样本。

温育：37℃孵育30-60分钟。

洗涤：用洗涤液洗板4-6次，拍干。

加酶标抗体：每孔加入酶标二抗，37℃孵育30分钟。

显色与终止：加入TMB显色液，避光显色10-15分钟，加终止液后立即读数。

结果计算：根据标准曲线计算样本浓度。

注意事项

样本需新鲜提取，避免反复冻融导致检测误差

试剂使用前需平衡至室温

洗涤过程需规范，避免交叉污染

不同批号试剂勿混用

仅限科研使用，不可用于临床诊断或人体实验

废弃物应按生物危害物处理

注意事项

严格按照说明书操作，避免交叉污染和非特异性结合。

样本避免反复冻融，未用完的板条密封冷藏（2-8℃）保存。

试剂盒组分不可混用，标准品建议一次性使用。

血浆、血清及组织样本需规范处理，避免溶血和杂质干扰。

该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点，是兔MIP-3α/CCL20定量检测及相关疾病机制研究的可靠工具，广泛应用于兔免疫、炎症、感染等领域的科研。

常见问题解答 (FAQ)

Q1: 为什么要做“复孔”？

A: 建议每个样本（包括标准品）都做复孔（2-3个孔）。这样可以计算平均值，减少操作误差，提高数据的可信度。

Q2: 样本需要稀释吗？

A: 是的。如果样本浓度过高，超出了标准曲线的检测范围，需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时，记得乘以稀释倍数。

Q3: 结果出现“花板”（背景不均）怎么办？

A: 可能原因包括：洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂（如底物）受光照分解。请检查洗板机是否堵塞，确保温育箱温度恒定。

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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。