小鼠Granzyme Belisa试剂盒 新品

小鼠Granzyme Belisa试剂盒

产品特点:

高灵敏度：灵敏度通常为0.91 pg/ml。

特异性强：采用双抗体夹心法，能特异性识别小鼠Granzyme B，避免交叉反应。

操作简便：提供完整的试剂和详细的实验步骤，方便科研人员操作。

结果准确：标准品线性回归相关系数R值≥0.9900，确保结果的可靠性。

检测原理

双抗体夹心法：将抗Granzyme B单克隆抗体包被在酶标板上，加入标准品或样本，Granzyme B与固相抗体结合。

信号放大：加入生物素化的检测抗体和辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，形成免疫复合物。

显色与定量：加入底物TMB显色，颜色深浅与Granzyme B浓度正相关，通过酶标仪在450 nm波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。

试剂盒组成

预包被微孔板：96孔或48孔，已包被捕获抗体。

冻干标准品：用于绘制标准曲线。

生物素化检测抗体：用于识别样本中的Granzyme B。

HRP标记的链霉亲和素：用于信号放大。

洗涤液、底物液、终止液：用于反应的洗涤、显色和终止。

其他：封板膜、说明书等。

适用样本

样本类型：血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等。

样本处理：需按照说明书进行处理，如离心去除沉淀、避免反复冻融等。

检测范围

浓度范围：通常为0.31 ng/ml至20 ng/ml。

保存条件

未开封：4℃保存。

已开封：标准品分装后-20℃保存，其他试剂4℃保存。

注意事项

操作规范：严格按照说明书操作，避免交叉污染。

安全防护：使用终止液时佩戴手套，避免接触皮肤和眼睛。

试剂盒组分：不同批号的试剂盒组分不得混用。

应用领域

科研研究：用于研究Granzyme B在免疫应答、炎症反应、细胞凋亡等生理和病理过程中的作用。

注意事项

严格按照说明书操作，避免交叉污染和非特异性结合。

样本避免反复冻融，未用完的板条密封冷藏（2-8℃）保存。

试剂盒组分不可混用，标准品建议一次性使用。

血浆、血清及组织样本需规范处理，避免溶血和杂质干扰。

该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点，是兔MIP-3α/CCL20定量检测及相关疾病机制研究的可靠工具，广泛应用于兔免疫、炎症、感染等领域的科研。

常见问题解答 (FAQ)

Q1: 为什么要做“复孔”？

A: 建议每个样本（包括标准品）都做复孔（2-3个孔）。这样可以计算平均值，减少操作误差，提高数据的可信度。

Q2: 样本需要稀释吗？

A: 是的。如果样本浓度过高，超出了标准曲线的检测范围，需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时，记得乘以稀释倍数。

Q3: 结果出现“花板”（背景不均）怎么办？

A: 可能原因包括：洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂（如底物）受光照分解。请检查洗板机是否堵塞，确保温育箱温度恒定。

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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。