小鼠Free Soluble RANKLelisa试剂盒 新品

产品介绍：

小鼠Free Soluble RANKL ELISA试剂盒用于定量检测小鼠血清、血浆、细胞培养上清等样本中的游离可溶性RANKL（Receptor Activator of Nuclear Factor κ B Ligand），在骨代谢、免疫调节、肿瘤及炎症等研究领域广泛应用。

核心特点

检测原理：采用双抗体夹心ELISA法。微孔板包被有抗小鼠RANKL特异性抗体，样本中的游离可溶性RANKL与抗体结合后，加入HRP标记的检测抗体，形成夹心复合物，TMB显色，OD值与RANKL浓度成正相关。

灵敏度与检测范围：部分试剂盒最低检测限可达0.2 pg/mL，检测范围宽泛（如0.313-20 ng/mL或2.5-800 pg/mL），适用于各类样本检测。

特异性：仅检测游离可溶性RANKL，不与膜结合型RANKL或其它结构类似物交叉反应，确保结果准确。

样本类型：血清、血浆（EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝）、细胞上清、组织匀浆等均可检测，建议避免溶血和反复冻融。

试剂盒规格：通常为48T或96T，2-8℃保存，有效期约6个月。

操作流程（简要）

样本及标准品加样：酶标板孔中加入标准品或待测样本，37℃孵育60分钟。

洗涤：洗板5次，去除未结合物质。

加酶标抗体：加入HRP标记的抗RANKL抗体，37℃孵育30分钟。

显色与终止：加入TMB显色液，避光反应15分钟，加终止液。

读数分析：酶标仪450 nm测定OD值，根据标准曲线计算RANKL浓度。

应用领域

可用于小鼠骨代谢、免疫调节、肿瘤转移、炎症反应及干细胞研究等，为生物医学科研提供可靠数据支持。

主要优点缺点

维度  优势 (Pros) 劣势 (Cons)

检测性能   灵敏度极高，特异性强，结果准确  可能存在交叉反应，易受干扰物影响

操作体验   流程标准化，无需昂贵设备，适合高通量检测   步骤多且繁琐，耗时较长，对操作技巧有要求

经济成本   适合大批量样本检测，长期看性价比尚可   单次试剂成本较高，且不同批次可能存在差异

应用范围   可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本   对样本质量（如是否溶血）敏感

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试剂与样本准备阶段

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。