小鼠Endoglinelisa试剂盒 新品

产品介绍：

试剂盒组成

预包被抗小鼠Endoglin抗体的96孔板：1块

重组小鼠Endoglin标准品（冻干）：2管

生物素标记抗小鼠Endoglin抗体（100X）：1管

亲和素-过氧化物酶复合物（ABC）（100X）：1管

样品稀释液：1瓶

抗体稀释液：1瓶

ABC稀释液：1瓶

TMB显色液：1瓶

终止液：1瓶

洗涤缓冲液（25X）：1瓶

封板膜：4张  

检测原理

双抗体夹心法：预先包被的抗体为Endoglin单克隆抗体，检测相抗体为Endoglin多克隆抗体，经生物素标记。

显色反应：样品和生物素标记抗体加入酶标板孔反应后，洗涤，加入过氧化物酶标记的亲和素反应；再次洗涤后，加入底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠Endoglin呈正相关。

操作步骤

准备试剂和仪器：酶标仪（450nm）、恒温箱（37℃）、加样器等。

设置孔板：标准品孔、样本孔和空白对照孔。

加样：标准品和样本加入相应的孔中。

温育：封板后于37℃温育一定时间。

洗涤：去除未结合的物质。

加酶标抗体：加入HRP标记的检测抗体，温育后洗涤。

显色：加入底物溶液，避光孵育。

终止反应：加入终止液，测定OD值。

注意事项

样本处理：避免溶血、高血脂样本，组织匀浆需充分裂解。

试剂准备：浓缩洗涤液需按比例稀释，使用前充分摇匀。

操作规范：严格按照说明书操作，避免交叉污染。

结果分析：根据标准曲线计算样本浓度，注意稀释倍数。

应用领域

科研研究：用于研究Endoglin在小鼠血管生成、细胞信号转导等过程中的作用。

疾病机制：探索与Endoglin相关的疾病机制，如心血管疾病、肿瘤等。

主要优点缺点

维度  优势 (Pros) 劣势 (Cons)

检测性能   灵敏度极高，特异性强，结果准确  可能存在交叉反应，易受干扰物影响

操作体验   流程标准化，无需昂贵设备，适合高通量检测   步骤多且繁琐，耗时较长，对操作技巧有要求

经济成本   适合大批量样本检测，长期看性价比尚可   单次试剂成本较高，且不同批次可能存在差异

应用范围   可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本   对样本质量（如是否溶血）敏感

公司正在出售的产品：

试剂与样本准备阶段

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。