小鼠CXCL12elisa试剂盒 新品

小鼠CXCL12elisa试剂盒

产品简介:

检测原理

采用双抗体夹心法（Sandwich ELISA），利用特异性抗体捕获样本中的CXCL12，再通过酶标记的抗体显色，颜色深浅与CXCL12浓度成正比。

主要组成

预包被抗体的酶标板：已包被针对CXCL12的捕获抗体。

生物素标记的检测抗体：用于与CXCL12结合。

酶标记的链霉亲和素（HRP-Streptavidin）：催化显色反应。

标准品：已知浓度的CXCL12，用于制作标准曲线。

洗涤液、底物液（TMB）、终止液：用于洗涤和显色反应。

检测步骤

加样：将标准品和样本加入酶标板孔中。

温育：使CXCL12与捕获抗体充分结合。

洗涤：去除未结合的物质。

加酶标抗体：加入生物素标记的检测抗体和酶标记的链霉亲和素。

显色：加入底物液，酶催化显色反应。

终止：加入终止液，终止反应。

测定：酶标仪测定吸光度，计算CXCL12浓度。

注意事项

样本处理：血清、血浆等样本需正确采集和保存，避免反复冻融。

操作规范：严格按说明书操作，避免交叉污染，确保实验准确性。

试剂保存：标准品需避光保存，其他试剂按要求储存。

应用领域

主要用于科研领域，研究CXCL12在炎症反应、免疫调节、肿瘤发生和组织修复等过程中的作用。

注意事项

严格按照说明书操作，避免交叉污染和非特异性结合。

样本避免反复冻融，未用完的板条密封冷藏（2-8℃）保存。

试剂盒组分不可混用，标准品建议一次性使用。

血浆、血清及组织样本需规范处理，避免溶血和杂质干扰。

该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点，是兔MIP-3α/CCL20定量检测及相关疾病机制研究的可靠工具，广泛应用于兔免疫、炎症、感染等领域的科研。

常见问题解答 (FAQ)

Q1: 为什么要做“复孔”？

A: 建议每个样本（包括标准品）都做复孔（2-3个孔）。这样可以计算平均值，减少操作误差，提高数据的可信度。

Q2: 样本需要稀释吗？

A: 是的。如果样本浓度过高，超出了标准曲线的检测范围，需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时，记得乘以稀释倍数。

Q3: 结果出现“花板”（背景不均）怎么办？

A: 可能原因包括：洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂（如底物）受光照分解。请检查洗板机是否堵塞，确保温育箱温度恒定。

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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。