病毒RNA提取试剂盒（磁珠法，预分装，快提） 新品

商品属性：

试剂盒核心特点

预分装设计

所有试剂（裂解液、磁珠、洗涤液等）均以单次用量预装于8联排管或96孔板中，避免人工分装误差，适配高通量自动化提取。

开盖即用：减少操作步骤，降低气溶胶污染风险。

适用范围

样本类型：血清/血浆（200μL）、咽拭子/鼻拭子（300μL裂解液）、细胞培养上清、粪便悬液等。

病毒类型：包膜病毒（如流感病毒、新冠病毒）与非包膜病毒（如诺如病毒）。

技术优势

高灵敏度：可提取低至50拷贝/mL的病毒RNA（经WHO标准品验证）。

快速流程：15分钟完成96例样本提取（配合自动化工作站）。

二、试剂盒组分与配置

1. 预分装组分（以96孔板为例）

孔位类型 内容物 单孔体积 功能说明

裂解孔 含离液盐/蛋白酶K的裂解液 400μL 病毒衣壳裂解，RNA释放

结合孔 硅基磁珠悬浮液（1μm粒径） 20μL 特异性吸附RNA

洗涤孔 Wash Buffer I/II（含乙醇） 500μL×2 去蛋白/去盐

洗脱孔 无核酸酶水（RNase-free Water） 50μL 低离子强度洗脱，兼容下游PCR

2. 辅助组件

蛋白酶K（冻干粉，需临用前加样激活）

载体RNA（1μg/μL，防止微量RNA降解）

阳性对照（灭活MS2噬菌体RNA）

三、操作流程（手动/自动化）

1. 手动操作（以咽拭子为例）

样本裂解：拭子头浸入裂解孔，涡旋震荡10分钟。

RNA结合：转移至结合孔，室温静置5分钟。

磁分离洗涤：磁力架吸附磁珠，依次转移至Wash I/II孔清洗。

洗脱：最后转移至洗脱孔，65℃孵育5分钟，收集RNA。

2. 自动化流程

适配机型：KingFisher Flex、QIAcube等。

程序预设：裂解（10min）→ 结合（5min）→ 洗涤（2×30s）→ 洗脱（5min）。

四、性能验证与质控

1. 关键参数

指标 性能标准 验证方法

提取效率 ≥95%（10拷贝/mL样本） qPCR Ct值对比标准曲线

纯度（A260/280） 1.9-2.1（无蛋白污染） Nanodrop检测

抑制物残留 内标Ct值偏移≤1.5（对比无样本对照） 添加外源RNA（MS2）

2. 质控建议

每批次检测：包含1个阳性对照（MS2 RNA）和1个阴性对照（PBS）。

环境监控：定期用RNase Alert检测台面污染。

五、注意事项与常见问题

样本处理

血浆需EDTA抗凝（避免肝素抑制PCR）。

粪便样本需10%悬液预处理，离心去颗粒物。

存储与稳定性

预分装板4℃保存6个月，避免反复冻融磁珠孔。

裂解液开封后需1周内用完（蛋白酶K易失活）。

故障排查

低得率：检查裂解时间是否充足，或增加载体RNA用量。

抑制物干扰：稀释洗脱RNA或增加洗涤次数。

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