伯氏疏螺旋体检测试剂盒(荧光 PCR 法) 新品

商品属性：

检测目标：特异性检测伯氏疏螺旋体（Borrelia burgdorferi），莱姆病（Lyme disease）的主要病原体，通过蜱虫叮咬传播。

方法原理：基于荧光定量PCR，靶向伯氏疏螺旋体的保守基因（如flaB（鞭毛蛋白基因）或ospA（外膜蛋白基因）），通过FAM通道检测，搭配内参基因（如人类β-actin，HEX通道）监控样本质量。

适用样本：全血（早期感染）、皮肤活检（游走性红斑部位）、关节液（晚期关节炎患者）、蜱虫组织（媒介检测）。

2. 检测流程

样本处理

全血/关节液：离心分离血浆或白细胞层，提取DNA。

皮肤活检：组织匀浆后裂解，离心取上清。

蜱虫：单个蜱虫研磨后提取DNA。

DNA提取

推荐磁珠法或柱式法（如QIAamp DNA Mini Kit），避免酚类抑制物干扰。

PCR扩增

反应体系：

引物探针：靶向flaB（FAM），内参（HEX）。

循环程序：95℃ 3min →（95℃ 15s → 60℃ 45s）×45循环。

结果判读

阳性：Ct≤35（FAM），且内参正常（Ct≤30）。

可疑：35<Ct<38，建议重复检测或测序确认。

3. 性能参数

指标  参数要求

灵敏度  ≤10 copies/反应

特异性  不与其他疏螺旋体（如B. miyamotoi）交叉

检出限  95%检出率（10^2 copies/mL血液）

抗干扰性  耐受5%血红蛋白或组织裂解物

4. 注意事项

假阴性风险：

早期感染血中病原体载量低，建议多次采样或检测IgM抗体辅助诊断。

样本需-20℃保存，避免DNA降解。

生物安全：操作需在BSL-2实验室进行，蜱虫样本需灭活后处理。

质控要求：每批次含阴性对照（无菌水）、阳性对照（含flaB质粒）。

5. 应用场景

临床诊断：莱姆病疑似病例（如游走性红斑、关节炎）的病原确认。

流行病学：蜱虫媒介带毒率调查。

宠物健康：犬类莱姆病筛查。

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