EBV-转化人淋巴细胞；EBV-Human

EBV-转化人淋巴细胞；EBV-Human

商品属性

产品描述

EBV（Epstein-Barr Virus，人类病毒4型）转化的B淋巴细胞系是通过体外感染人外周血B细胞建立的永生化细胞模型。该技术利用EBV的潜伏感染特性，使B细胞获得持续增殖能力，广泛应用于免疫学研究、抗体生产及肿瘤机制探索等领域。

主要组分

EBV病毒上清液

来源：EBV表达细胞系（如B95-8）的过滤上清液，含活性病毒颗粒。

储存条件：-80℃避光保存，避免反复冻融。

培养基与试剂

基础培养基：IMDM或RPMI-1640，含10%-20%胎牛血清（FBS）。

添加剂：青霉素（100 IU/mL）、链霉素（100 μg/mL）。

冻存液：含10% DMSO的FBS。

辅助试剂

PBS缓冲液（无钙镁）、淋巴细胞分离液（如Ficoll-Paque）。

操作流程

B细胞分离

采用密度梯度离心法从人外周血中分离单个核细胞（PBMCs），进一步纯化CD19+ B细胞。

EBV感染

将B细胞与EBV上清液共孵育（37℃、5% CO₂，2-4小时），随后更换为完全培养基。

培养与监测

每周观察细胞团簇形成，维持细胞密度在0.5-1×10⁶/mL。

转化成功标志：4-6周后出现稳定增殖的细胞集落。

质量控制

无菌检测：排除支原体及细菌污染。

EBV潜伏状态验证：通过PCR检测EBNA-1/2或LMP-1表达。

细胞表型鉴定：流式细胞术确认CD19/CD20阳性。

注意事项

生物安全：EBV为潜在致癌病原体，需在BSL-2实验室操作。

伦理合规：使用人源材料需符合当地伦理审查要求。

稳定性：永生化细胞系可能随传代发生遗传漂变，建议早期冻存备份。

应用领域

抗体分泌细胞系的建立

免yi调节机制研究

病毒-宿主相互作用模型

储存与运输

冻存细胞液氮长期保存，运输需使用干冰。
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