貂肺上皮细胞；Mv1lu 新品

                                                          貂肺上皮细胞；Mv1lu
产品信息：

来源与背景

源自银貂（Mustela vison）胚胎肺组织，属上皮细胞系。

关键特征：

对鼠科肉瘤病毒（Moloney sarcoma virus）和猫科肉瘤病毒高度敏感，可用于病毒焦点形成检测。

表达角蛋白（Cytokeratin），贴壁生长呈铺路石状。

应用领域：病毒学研究、肿瘤转化机制、基因转染宿主细胞。

形态与生长特性

形态：上皮细胞样（多边形），贴壁生长。

倍增时间：约24-36小时（37℃条件下）。

培养条件：37℃、5% CO?，饱和湿度环境。

培养操作流程

培养基与试剂

基础培养基：

推荐：MEM（含NEAA）或MEM-EBSS。

添加成分：

10%胎牛血清（FBS）

1%青霉素-链霉素（P/S）。

消化液：0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA。

冻存液：90% FBS + 10% DMSO 或专用无血清冻存液。

传代培养（贴壁细胞）

消化监控：

细胞汇合度达80%-90%时操作。

弃旧培养基，PBS洗涤1次，加入胰酶（T25瓶1 mL），37℃消化1-2分钟。

关键点：镜下观察细胞间隙变大、部分变圆即终止消化。

终止与离心：

加入2倍体积完全培养基终止消化，轻柔吹打制成单细胞悬液。

1000 rpm离心5分钟，弃上清。

重悬与分瓶：

用1-2 mL完全培养基重悬，按 1:2至1:4比例 分瓶。

补充新鲜培养基至T25瓶6-8 mL，37℃、5% CO?培养箱培养。

冻存与复苏

冻存：

收集对数生长期细胞，密度调至5×10?–1×10? cells/mL，程序性冻存（-80℃过夜→液氮）。

复苏：

37℃水浴快速解冻，转移至含5 mL预温培养基的离心管。

1000 rpm离心5分钟，重悬接种至T25瓶，次日换液。

关键注意事项

贴壁能力弱

运输或消化后易脱落，需离心收集上清液中的细胞。

培养瓶建议预先包被（如多聚赖氨酸）。

污染防控

支原体检测为阴性（供应商质控）。

收货后立即拍照记录（40×, 100×, 200×），作为售后依据。

特殊处理

运输后处理：常温运输需静置3-4小时再观察，若细胞脱落可离心重悬。

空泡现象：密集培养时细胞内可见空泡，属正常特性。

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注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。