草鱼吻皮细胞；ZC-79001

                                                          草鱼吻皮细胞；ZC-79001
产品信息：

来源与背景

源自草鱼（Ctenopharyngodon idellus）吻端组织，属上皮样贴壁细胞。

关键特征：

对草鱼呼肠孤病毒（GCRV）高度敏感，是水产病毒学研究的核心工具。

可用于病毒增殖、疫苗开发及鱼类抗病机制研究。

应用领域：草鱼出血病疫苗生产、环境毒理学（如重金属毒性评估）。

形态与生长特性

形态：成纤维细胞样（梭形），贴壁生长。

倍增时间：约24-36小时（28℃条件下）。

培养条件：28℃（无需CO?环境），部分文献建议37℃。

培养操作流程

培养基与试剂

基础培养基：

推荐：MEM或DMEM（含2 mM L-谷氨酰胺）。

添加成分：

10%胎牛血清（FBS）

1%青霉素-链霉素（P/S）。

消化液：0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA。

冻存液：90%完全培养基 + 10% DMSO。

传代培养（贴壁细胞）

消化监控：

细胞汇合度达80%-90%时操作。

弃旧培养基，PBS洗涤1次，加入胰酶（T25瓶1 mL），28℃消化1-2分钟。

关键点：镜下观察细胞变圆、边缘发亮即终止消化。

终止与离心：

加入2倍体积完全培养基终止消化，轻柔吹打制成单细胞悬液。

1000 rpm离心5分钟，弃上清。

重悬与分瓶：

用1-2 mL完全培养基重悬，按 1:2至1:4比例 分瓶。

补充新鲜培养基至T25瓶6-8 mL，28℃恒温培养。

冻存与复苏

冻存：

收集对数生长期细胞，密度调至5×10?–1×10? cells/mL，程序性冻存（-80℃过夜→液氮）。

复苏：

37℃水浴快速解冻，转移至含5 mL预温培养基的离心管。

1000 rpm离心5分钟，重悬接种至T25瓶，次日换液。

关键注意事项

温度敏感性

严格维持28℃培养（±1℃），高于30℃导致不可逆损伤。

污染防控

支原体、细菌、真菌检测为阴性（供应商质控）。

收货后立即拍照记录（40×, 100×, 200×），作为售后依据。

特殊处理

贴壁弱细胞：运输中易脱落，需离心收集上清液，胰酶轻柔消化。

病毒接种：感染GCRV后需降低培养温度至25-28℃以促进病毒增殖。

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注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。