草鱼胚胎细胞；CP-88

                                                          草鱼胚胎细胞；CP-88
产品信息：

来源与建立

CP-88细胞系由草鱼（Ctenopharyngodon idellus）胚胎组织自然生长而成，属上皮样贴壁细胞，对草鱼呼肠孤病毒（GCRV）高度敏感，广泛用于水生病毒学及环境毒理学研究。

形态与生长

形态：上皮细胞样，胞体呈多边形，细胞核居中。

生长特性：贴壁生长，汇合度达80%-90%时需传代，推荐传代比例1:2至1:3。

遗传背景

染色体数目为2n=48，属二倍体细胞系，可稳定传代50代以上。

培养操作指南

培养条件

基础培养基  MEM（最低必需培养基）或L-15

血清添加  10%-20%胎牛血清（FBS）

添加剂  1%双抗（青霉素/链霉素）

培养环境  25-28℃（最适），无需CO?（L-15培养基）或5% CO?（MEM培养基）

传代比例  1:2至1:3（汇合度80%-90%时传代）

冻存条件  90% FBS + 10% DMSO，程序降温后液氮保存

操作步骤

复苏

37℃水浴快速解冻冻存管，转移至含5 mL完全培养基的离心管，1000 rpm离心5 min。

弃上清，细胞沉淀用完全培养基重悬，接种至T25瓶，28℃培养箱静置2-4小时后观察。

传代

PBS清洗贴壁细胞，加入1 mL 0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化1-2分钟。

显微镜下观察细胞变圆脱落，加入完全培养基终止消化，离心（1000 rpm，5 min）后重悬分瓶。

冻存

对数期细胞经胰酶消化后，离心收集细胞沉淀。

用冻存液重悬（密度≥1×10? cells/mL），程序降温至-80℃后转入液氮。

关键注意事项

温度敏感性

最适培养温度为25-28℃，高于30℃易导致细胞代谢异常。

污染防控

初代培养需严格消毒（2%碘酊+75%酒精），组织块清洗5-6次。

收到细胞后立即用75%酒精消毒管壁，检查细胞形态及污染情况。

特殊变体

CP-88/RFP：带红色荧光标记的亚系，需添加嘌呤霉素维持筛选压力（4 μg/mL）。

CP-88/GFP：带绿色荧光标记，培养基中需添加G418。

应用场景与局限性

研究用途：

病毒学研究：草鱼呼肠孤病毒（GCRV）增殖及抗病毒药物筛选。

环境毒理学：水污染物（如重金属）对鱼类细胞的毒性评估。

局限性：

温度敏感性限制其在常温培养箱的应用。

仅限科研使用，不可用于食品或临床开发。

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注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。