斑马鱼胚胎细胞；ZEM2S

                                                          斑马鱼胚胎细胞；ZEM2S
产品信息：

来源与建立

ZEM2S细胞系源于斑马鱼（Danio rerio）胚胎，由ZEM2细胞系经筛选获得。其建立依赖复合培养基（含胰岛素、鳟鱼胚胎提取物、胎牛血清），并于1993年通过优化培养条件获得稳定亚系。

形态与生长

形态：成纤维细胞样（部分描述为上皮样，可能与培养条件相关）。

生长特性：严格贴壁生长，推荐传代比例为1:2至1:6。

种属与背景

种属：斑马鱼（鲤科鲐属），广泛用于发育生物学、毒理学及疾病模型研究。

应用价值：提供体外系统用于胚胎增强子/启动子活性研究，以及细胞分化调控因子的检测。

二、培养操作指南

培养条件

基础培养基  L-15培养基

血清添加  10%胎牛血清（FBS）

添加剂  15 mM HEPES，碳酸氢钠

培养环境  95%空气 + 5% CO?，37℃

传代比例  1:2至1:6（推荐1:3），每周2-3次

冻存条件  85%完全培养基 + 10% FBS + 5% DMSO，液氮保存

操作步骤

复苏与接种

快速解冻冻存管，转移至含6-8 mL完全培养基的T25瓶，37℃静置2-3小时贴壁。

离心（1000 rpm，5 min）后弃上清，重悬接种至新培养瓶。

传代

PBS清洗贴壁细胞，加入0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化1-2分钟。

显微镜下观察细胞变圆脱落，加入完全培养基终止消化，离心后分瓶（推荐1:3比例）。

冻存

对数生长期细胞经胰酶消化后，离心收集细胞沉淀。

用冻存液重悬，程序降温至-80℃后转入液氮。

三、关键注意事项

污染防控

严格无菌操作，定期检测支原体。

若收到污染细胞（如运输破损、复苏后无存活），可申请重发（需提供3天内照片证据）。

细胞状态维护

避免消化过度或吹打过猛，防止细胞损伤。

冻存密度建议≥1×10? cells/mL，确保复苏活性。

特殊要求

培养基需预平衡至37℃，避免温度波动影响细胞贴壁。

建议使用低蒸发培养瓶（如T25）维持湿度。

四、应用场景与局限性

研究用途：

斑马鱼早期胚胎增强子/启动子活性比较。

细胞分化调控因子的体外检测（如毒理学筛选）。

局限性：

为鱼源细胞系，部分信号通路与哺乳动物存在差异。

需定期验证细胞形态及生长特性。

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注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。