人胸膜积液B淋巴细胞；BC-3

                                                          人胸膜积液B淋巴细胞；BC-3
产品信息：

来源与背景

BC-3细胞于1995年从一名85岁原发性渗出性淋巴瘤（PEL）患者的胸腔积液中建立，患者未感染HIV。该细胞携带人类疱疹病毒8型（HHV-8），但不携带EB病毒，属于B淋巴母细胞样悬浮细胞。

生长与形态

倍增时间：每周需传代2-3次，维持密度在5×10?～2×10? cells/mL。

鉴定与质量控制

STR分型：Amelogenin X, CSF1PO 11,12, D2S1338 24,25等18个位点特征明确。

污染检测：支原体、细菌、真菌及HIV-1/HBV/HCV均为阴性。

二、培养操作指南

培养条件

基础培养基  RPMI-1640（推荐含L-谷氨酰胺）

血清添加  10%-20%胎牛血清（FBS）

添加剂  1%双抗（青霉素/链霉素）

培养环境  37℃、5% CO?、饱和湿度

传代比例  1:2至1:5（推荐1:3）

冻存条件  90% FBS + 10% DMSO，或无血清冻存液（程序降温）

操作步骤

复苏

37℃水浴快速解冻冻存管，转移至含6 mL完全培养基的离心管，1000 rpm离心5 min。

弃上清，用完全培养基重悬接种至T25瓶，培养箱静置2-4小时后观察。

传代

悬浮细胞：直接离心收集细胞（1000 rpm，5 min），弃上清后重悬分瓶。

半量换液法：弃半数培养基，补加新鲜培养基并混匀后分瓶。

冻存

对数期细胞离心后，用冻存液重悬（密度≥1×10? cells/mL），程序降温至-80℃后转入液氮。

三、关键注意事项

细胞状态维护

密度监控：密度过高（>2×10? cells/mL）易导致营养耗竭，需及时传代。

消化控制：若需贴壁培养（如实验需求），胰酶消化时间不超过2分钟。

污染与安全

生物安全等级为1级，但操作仍需在生物安全柜中进行。

收到细胞后立即用75%酒精消毒管壁，检查细胞形态及污染情况。

特殊现象

空泡形成：高密度培养时细胞内可能出现空泡，属正常特性。

细胞成团：吹打时需轻柔，避免机械损伤（可使用宽口移液管）。

四、应用场景与局限性

研究用途：

HHV-8与淋巴瘤发生机制研究。

抗肿瘤药物筛选（如靶向B细胞信号通路）。

局限性：

悬浮细胞易聚集，影响实验均一性。

需定期验证病毒载量（HHV-8）及STR谱型。

公司正在出售的产品：

注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。